Ingeniero Quimico

Universidad Rafael Carlos Monzón Ramazzini
Facultad de Ingeniería Carnet: 20608-98
Curso: Laboratorio Química Orgánica II Sección: 5
Ciclo: 2do ciclo 2012 Fecha de entrega:24.08.2014
Catedrática: Carmen GarnicaMarroquín


PRE-LABORATORIO # 1
“Identificación de Analgésicos por TLC “

1. Objetivos:
a) Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, (ccf), sus características y los
factores que en ella intervienen.
b) Calcular valores de Rf de varias sustancias y correlacionarlo a la selección
adecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la polaridad de lassustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.
c) Aplicar la técnica de cromatografía en capa fina como criterio de pureza e
identificación de sustancias.










2. Fundamento teórico:
La cromatografía de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar moléculas relativamente pequeñas. En la biología celular se utiliza frecuentemente para separar azúcaressimples, lípidos, aminoácidos, nucleótidos, metabolitos, y ocasionalmente para separar cadenas cortas de polipéptidos y ácidos nucleicos. Al igual que otras cromatografías, consiste de una fase estacionaria y una fase móvil y el principio es el mismo: la sustancia de interés se adherirá a la fase estacionaria o se moverá con la fase móvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a laafinidad por la fase estacionaria.
 
La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie sólida (una placa de vidrio, aluminio, plástico o papel). Esta superficie sólida puede ser rígida o flexible. El tipo de fase estacionaria que se utilice en un experimento dependerá del tipo de moléculas que sequieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgánico o una mezcla de ambos.
 
Los productos a examinar se disolverán, cuando sea posible, en un disolvente orgánico que tenga un punto de ebullición lo suficientemente bajo para que se evapore después de la aplicación, lo más común es usaracetona. Frecuentemente se emplean disoluciones al 1 %, de manera que al aplicar 2 ml resulta en la carga 20 mg de producto sólido. Muchos reactivos de revelado llegan a detectar 0.1 mg de material; por esto con esta carga puede llegarse a observar un 5 % de impurezas.
Existen una gran variedad de micro pipetas y micro jeringuillas para realizar el proceso de siembra de la muestra a analizar. Tambiénpueden usarse tubos capilares. El proceso de siembra se realiza tocando con la punta del capilar (micro pipeta, etc.) sobre la placa preparada. Dejando una distancia al borde inferior de un centímetro aproximadamente. El punto de aplicación de la muestra se denomina toque.
Una vez colocado el toque se deja secar para evaporar el disolvente, de forma que en la placa solo quedará la muestra aanalizar. se anota en el cuaderno la identidad del eluyente y la relación de los dos, o más que se hayan utilizado.







Elección del eluyente:
La elección del eluyente depende del componente que se va a separar y del material en que la separación se lleva a cabo. Un método que se emplea para la selección del eluyente es una cromatografía en capa fina con distintos disolventes y unasmuestras patrón.
Principales eluyentes en orden creciente de polaridad:
Éter de petróleo
Éter dietílico
Ciclohexano
Acetato de etilo
Tetracloruro de carbono†
Piridina†
Benceno†
Etanol
Cloroformo†
Metanol
Diclorometano
Agua
Ácido acético
† compuestos cancerígenos.
En la elección del eluyente influyen varios factores:
Precio.
Pureza.
No utilizar mezclas de eluyentes a menos que se...