Inmunohistoquimica
INMUNOHISTOQUIMICA
Dra. Elizabeth Orellana
Patóloga
INMUNOHISTOQUIMICA
INMUNOHISTOQUIMICA
Técnica que combina la histología con
con
la inmunología en la determinación de
la
de
antígenos celulares (su presencia y
ant genos
localización micro anatómica).
localizaci
Utilidades
1. Determinación de linaje (histogénesis /
1.
histoatipia).
histoatipia
* A.Clasificación neoplasia
neoplasia
indiferenciada.
* B. Determinación de origen en
B.
de
enfermedad metastásica de
metast
de
primario no clasificable.
2. Selección de regimenes terapéuticos:
2.
* A. Neoplasias hormono dependientes
(receptores hormonales).
(receptores
* B. Oncoproteínas sensibles a
medicamentos específicos.
medicamentos
Her 2 Neu
CD117
3. Ayuda Pronóstica
3.* Metástasis ocultas
* Resistencia quimioterapéutica
* Mutaciones (p53)
* Indicadores de trasformación (células
mioepiteliales, células basófilas).
* Indicadores de proliferación celular y
clonal
· Ki67
· Antígeno nuclear de proliferación
nuclear
4. Diagnóstico en Enfermedades
4.
Infecciosas:
Infecciosas:
* Virus – Hepatitis, HPV, Hiv-1, Herpes.
* Bacterias – Histoplasma.
*Hongos – Criptococo.
* Protozoos – Giardia, Amebas.
Materiales
Materiales
Materiales (sustrato):
Materiales
1. Se utiliza tejido “viable antigenicamente”
Se
fijado en formol u otro y procesado en
fijado
parafina.
parafina.
2. Productos de citología.
3. Tejido congelado.
Metodología
Metodolog
Altos estándares en control de calidad.
Altos
Ambiente:
Ambiente:
Temperatura.Temperatura.
Humedad.
Humedad.
Iluminación.
Iluminaci
Nivelación.
Nivelaci
Equipo:
Equipo:
Cuchillas descartables
Cuchillas
Procesador de tejidos (+ baño de
Procesador
parafina)
Incubadora
Incubadora
Cámaras de humedad
Cámara de termorregulación
Materiales:
Materiales:
Reactivos:
Reactivos:
Solución de rescate antigénico
Soluci
Enzimas proteolíticas (predigestiónEnzimas
proteasa)
Buffer
Buffer
Controles negativos y positivos
Controles
Anticuerpos:
Anticuerpos:
Concentración (dilución)
Concentraci
Especifidad y sensibilidad
Especifidad
MAQUINA DE IPX
HISTORIA DE LA
INMUNOHISTOQUIMICA
INMUNOHISTOQUIMICA
1940
1940
Coons
1942
1942
Coons;
Creech, Jone
Creech Jone
1965
Sternberg
1966
Graham,
Karnovski
KarnovskiDetección Ag con Ac
Ag con Ac
fluorescentes en cortes
fluorescentes
congelados.
Ac. Secundarios (Ag
Pneumococo)
Detección de Ac con metales
de Ac con
pesados (Uranium)
pesados
Utilización de enzimas PEROXIDASA
1697
Nakane, Pierce
Pierce
Utilización de complejos de Ac y enzimas
de
Ac enzimas
INMUNOPEROXIDASA
1970
1970
Sternberg
Utilización de Peroxidasas /Antiperoxidasas (PAP) Ag + Ac
de Peroxidasas Antiperoxidasas (PAP) Ag Ac
Primario + Ac Secundario + PAP
Primario Ac
1974
1974
Heitzman &
Richardson
Richardson
Desarrollo del Método
todo
Avidina – Biotina,
Avidina Biotina,
Streptoavidina – Biotina
Biotina
Uso de digestión
enzimática – Proteasas –
enzim
Proteasas
1975
1975
H Uang
Uang
1976
Strauss
I Simposio Mundialen Amsterdam
en Amsterdam
Inhibición peroxidasas
peroxidasas
endógenas
1979
Heydeerman E.
E.
Controles
1987
1987
Kelly J; Whelan
J; Whelan
Ac. Monoclonales
Monoclonales
1988
1988
Leong As.
As.
Utilización Microondas (altas temperaturas)
Utilizaci Microondas
1991
1991
Frankel, Shi, Conrat
Shi Conrat
Técnicas de Rescate Antigénico
nico
Shi, ImanIman
Autoclave, STeamer)
STeamer
pH, Ac Monoclonales, Rescate (Olla de Presión, Microondas,
Ac
n,
1995 –
1996
INMUNOHISTOQUIMICA
EN GUATEMALA
EN
1986
1986
Dr. Miguel A. Garcés
Panel Aproximadamente de 10 Ac
Ac
* Desconicimiento de la técnica y sus aplicaciones
cnica
* Costos – Paneles
Costos Paneles
* Reacciones Cruzadas
Reacciones
1989 –
1995
1998
1998...
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