inmunohistoquimica

INTRODUCCIÓN
En los procesos de análisis clínicos que involucren directamente al tejido hepático, resulta de gran utilidad el
determinar los niveles sericos de Transaminasas , como lo son la alanina aminotransferasa (ALT ó TGP) y la
aspartato aminotransferasa (AST ó TGO), ya que comparando los valores de actividad ALT v/s AST, es
posible determinar el origen hepático, ó en su defecto cardiaco, al observar alteraciones en estos patrones
enzimáticos.
Por otro lado , resulta muy útil para diferenciar hepatitis alcohólicas de otras hepatitis agudas, esto
relacionando AST/ALT: En las hepatitis alcohólicas(con necrosis) este índice es generalmente mayor a 1
(AST aumentada por sobre ALT), mientras que en las hepatitis virales es generalmente menor a 1 (AST
disminuida ante ALT).
En fincualquiera que sea el caso , la determinación de estas enzimas adquiere importancia diagnóstica cuando
sus valores son enfrentados con valores de otras enzimas de similar origen tisular, permitiendo así completar
un perfil enzimático de órganos como el hígado.
MÉTODO DE REFERENCIA Y DE RUTINA
TGO
(AST, ASPARTATO AMINOTRANFERASA)
METODO DE IFCC (FEDERACION INTERNACIONAL DE QUIMICA CLINICA)Descripción.
La Aspartato aminotransferasa es una enzima que se encuentra localizada tanto a nivel citoplasmático
como mitocondrial, de allí que se diga que es una enzima bilocular , se encuentra ampliamente
distribuida en músculo esquelético, riñón , cerebro y principalmente en higado y corazón, donde esta en
mayor concentración.Cualquier alteración en estos tejidos, se vera reflejado en unaumento en el
torrente circulatorio de esta enzima, el cual será directamente proporcional al daño tisular.
En aquellos pacientes con afecciones hepáticas se observan las mayores elevaciones de AST, sobre todo en
aquellos casos de hepatitis con necrosis.
Fundamento.
La reacción es catalizada por la TGO (AST), ésta desplaza la reacción hacia la formación de Oxaloacetato que
reacciona con laMDH (Malato Deshidrogenasa), de modo que la velocidad de oxidación del NADH medida a
340 nm, es directamente proporcional a la actividad de TGO en la muestra.
En el medio de reacción hay además LDH (Lactato Deshidrogenasa) suficiente para consumir los cetoácidos
de origen endógeno, evitando así su interferencia.
Reacción.
TGO
L−aspartato + 2−oxoglutarato Oxalacetato + L−glutamato
1Oxalacetato + NADH + H+ L−malato + NAD+
MDH
Muestra.
• Suero, Plasma (Heparinizado, EDTA).
• Muestras hemolizadas no se aceptan ya que poseen elevados niveles de AST dentro de los eritrocitos.
Linealidad.
Si el cambio por minuto de absorbancia excede de 0.160 (340nm y 334 nm) ó 0.080 (365), diluir la muestra
1+ 4 con suero fisiológico. Multiplicar el resultado por 5.
La absorbancia inicial debeser superior a 0.8 A. En caso de no serlo se puede estar en presencia de
actividades enzimáticas muy elevadas y obtener resultados erróneos. Diluir la muestra y reprocesarla.
Metodología de Análisis.
*Lectura: Hg 365 nm, 340 nm, 334 nm.
*Paso Óptico: 1 cm.
*Temperatura: 37°C.
*Medición: Contra aire.
Los reactivos y cubetas deben ser llevados a la temperatura del ensayo, la que debemantenerse
constante durante el desarrollo del test.
Valores Normales.

Hombre
Mujer

37°C (U/L)
Hasta 37
hasta 31

Ventajas.
• Simple y Rápido
Desventajas.
• Resulta imposible o poco práctico modificar las mezclas reactivas preestablecidas.
• Sueros hemolizados dan valores falsamente aumentados.
• Los sueros con concentraciones de cetoácidos endógenos elevados generan valores
falsoselevados.
• Pacientes hemodializados o con hipovitaminosis u otras patologias asociadas con déficit de Piridoxal
Fosfato (coenzima), generan valores falsamente disminuídos.
Consideraciones.
2

• A mayor temperatura se obtiene mayor sensibilidad , pero un menor rango de linealidad .
• La preincubación con parte del reactivo es para evitar interferencia con cetoacidos endógenos del
suero.
•...