Inoculación en medios de cultivo e interpretación de resultados

TEMA: Inoculación en medios de cultivo e interpretación de resultados
OBJETIVOS:
Aprender a manejar las diferentes técnicas de los diferentes medios de cultivo con el fin de profundizar dichas técnicas dentro del laboratorio.
Inocular de manera correcta las suspensiones bacterianas en los diferentes medios de cultivo y saber interpretar resultados de parámetrosestablecidos.
Conocer las diferentes técnicas de crecimiento bacteriano así como su forma, tamaño, color, etc.
FUNDAMENTO TEÓRICO:
Técnicas de siembra
Método de siembra por estría en placa
Para este técnica, con un asa de siembra se toma una muestra de la población mixta y a continuación se hacen estrías sobre la superficie de un medio sólido preparado en una placa Petri. Conformese van haciendo estrías en zigzag con el asa, cada vez se van depositando en la superficie del medio menos microorganismos. A continuación, se flamea el asa, se toca en la región donde se han realizado las últimas estrías y se continúa la siembra con la misma técnica, en la superficie de medio sin sembrar aún. Repitiendo este proceso varias veces se logra separar células individuales. Acontinuación, las placas se incuban en un lugar adecuado, permitiendo que las células aisladas experimenten un número suficiente de divisiones para formar colonias visibles.
Método de vertido en placa y extensión en placa
En estos métodos, las suspensiones de células microbianas se diluyen antes de su siembra en placa. Para realizar diluciones de diez en diez, se añade 1 ml de la suspensión bacterianaa 9 ml (le medio estéril o solución salina, igualmente estéril. Se agita vigorosamente para diluir las células y el proceso se repite cuantas veces sea necesario. A continuación, se puede proceder de dos maneras diferentes.
En el método de vertido en placa, las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se vierten en placa. Algunas colonias quedarán embebidas en el agar y otras creceránen la superficie. Las colonias superficiales se extenderán y serán más grandes.
En el método por extensión en placa, las muestras diluidas se siembran directamente en la superficie de la placa de agar, extendiéndolas con ayuda de un asa de Diralsky de cristal estéril. La suspensión se absorbe en el agar, dejando las células microbianas sobre la superficie.
Inoculación por picadura
Es unatécnica que utiliza la aguja de inoculación y requiere de un medio de cultivo semisólido en un tubo, a menudo se usa para detectar la movilidad de una bacteria.
Inoculación en medios líquidos
Es una técnica que requiere de un medio de cultivo líquido y de una asa de inoculación la misma que contiene el inoculo que se suspende en el medio líquido.
Condiciones ambientales idóneas para elcultivo en el laboratorio
Un medio se formula para suministrar todos los nutrientes que un microorganismo necesita para crecer, pero esto no es suficiente. En el laboratorio, también es preciso aportar las condiciones ambientales adecuadas. Tanto la temperatura como el pH deben estar dentro del intervalo apropiado; con respecto al oxigeno, según el caso, será aportado o eliminado.
TemperaturaCada especie bacteriana se caracteriza por un intervalo de temperatura en el cual presenta su crecimiento óptimo. Pero, en general, los microorganismos crecen más rápidamente cuando se aumenta la temperatura, sin llegar hasta un punto en el cual se dañan las proteínas. Así pues, para favorecer un crecimiento rápido, las bacterias se suelen cultivar a la temperatura más alta a la cual crecen bien,y que suele ser la de su medio natural.
pH
El pH óptimo depende de la especie bacteriana, pero cada una de ellas crece en un intervalo de pH relativamente estrecho. Casi todas las bacterias crecen mejor a valores de pH próximos a la neutralidad, en el intervalo de 6,5 a 7,5. Sin embargo, los hongos crecen mejor entre 4,5 y 6,0.Aunque el pH de un medio sea el adecuado cuando se inicia...