invertasa

UNIVERSIDAD DE PANAMÁ
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES, EXACTAS Y TECNOLOGÍA
REPORTE DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PROF. ASISTENTE: ALEXANDER AROSEMENA
“Preparación y estudio cinético de lainvertasa”


Integrantes: Arelys Mendoza 2-731-1051, Sahyra Marín 8-872-1786, Juan Vega 8-766-1359, Sayly Moreno 6-710-90

Introducción: La enzima invertasa cataliza la hidrólisis de la sacarosa aglucosa y fructosa, frecuentemente a esta reacción se denomina “inversión”. La invertasa se puede conseguir de células de levadura que se rompen por auto lisis, centrifugando y tomando el sobrenadante.
Enesta práctica vamos a ver la acción de la invertasa y los efectos de la temperatura, pH, concentración y posteriormente el caculo de la constante de Michaelis-Menten.
Efecto de la concentración dela enzima
Tubo de ensayo Enzima diluida (mL) Absorbancia leída a 510nm
Blanco ---- 0,001
1 1,0 0,280
2 0,2 0,518
3 0,3 0,725
4 0,4 0,911
5 0,5 0,982
6 1,0 1,000





Determinación delpH óptimo de la invertasa
Tubo de ensayo pH Absorbancia leída a 510nm
Blanco ---- 0,0
1 4,0 0,364
2 4,6 0,524
3 5,0 0,481
4 6,0 0,333
5 7,0 0,525
6 8,0 0,405
7 ---- 0,400Efecto de la temperatura sobre la actividad de la invertasa
Tubo de ensayo Temperatura Absorbancia leída a 510nm
Blanco 37°C 0,006
1 200C 0,485
2 300C 0,592
3 400C 0,700
4 600C 0,712Determinación de la constante de Michaelis-Menten (Km)
Tubo de ensayo Absorbancia leída a 510nm Velocidad 1/V 1/[S]
Blanco 0,001 0.0001 0 0
1 0,357 0.0357 28.01 20
2 0,2110.0211 47.39 6.67
3 0,265 0.0265 37.73 4
4 0,416 0.0416 24.03 2
5 0,607 0.0607 16.47 1
6 0,833 0.0833 12 0.5



















Conclusión
1- Se determino el efecto de laconcentración de la enzima invertasa, donde la concentración es directamente proporcional a la velocidad de la reacción, esto se debe a que entre más alto sea la concentración de enzima, más complejos...