kjnk

Práctica No. 6
Extracción de ADN humano

Introducción
La extracción de ADN es uno de los procedimientos más útiles en biología molecular. La pureza y cantidad de ADN son factoresfundamentales a la hora de realizar metodologías como la PCR, la clonación de fragmentos de ADN, la digestión con enzimas de restricción o la secuenciación. Esto, debidoa la interferencia que pueden presentar compuestos como nucleasas, proteínas, iones u otros compuestos.
En esta práctica se lleva a cabo la extracción de ADN a partir de células epiteliales deboca. Es importante resaltar que los protocolos de purificación de ADN se extienden a otros tejidos, organismos o incluso medios. La diversidad de fuentes de obtención de ADN supone retosdistintos al procesamiento de las muestras, debido a las condiciones fisicoquímicas diferenciales que estas presentan.
El proceso de purificación de ADN humano llevado a cabo en esta prácticase realiza mediante el uso del kit Quick-gDNA™ MiniPrep (Zymo Research). Se pretende estudiar la calidad del ADN extraído mediante este procedimiento con el fin de familiarizar alestudiante con los procedimientos básicos de biología molecular como son: la electroforesis, la extracción y purificación de ADN.

Objetivos
Comprender los principios involucrados en elproceso de extracción de ADN.
Realizar la extracción y purificación de ADN a partir de células epiteliales de boca.
Analizar la importancia de este procedimiento en el desarrollo dela biología molecular.
Visualizar el ADN extraído en geles de agarosa.

Materiales y Métodos
Obtención de células epiteliales y Lisis
1. Enjuagar la boca vigorosamente con 20ml desolución salina.
2. Agregar la solución a un tubo Falcon.
3. Centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos a 4°C y descartar el sobrenadante.
4. Agregar 500ul de Genomic Lysis Buffer, realizar vortex por...