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PRÀCTICA No 1
ESTERILIZACION Y DESINFECCION
OBJETIVOS:
1. El alumno podrá describir los principales métodos de esterilización utilizados en el campo medico.
2. Comprobara el efecto de la incineración y desinfección de un producto biológico.
3. Ensayara el método de esterilización en autoclave aplicado a un medio de cultivo bacteriológico.
DESARROLLO:
Prueba de esterilización ydesinfección.
1. Se obtiene una muestra de saliva y se coloca en un vaso de precipitado.

2. Se introduce una varilla de vidrio en la muestra.

3. Teniendo cerca el mechero se inocula el primero de los cuatro tubos con caldo tioglicolato, con el extremo de la varilla de vidrio previamente contaminada con saliva y se marca como TESTIGO DE CONTAMINACIÒN.

4. Se vuelve a contaminarla varilla con la saliva y se introduce en un vaso de precipitado que contenga alcohol de 96º por 5 minutos, posteriormente se saca y se deja secar al aire, después se inocula el segundo tubo con caldo tioglicolato y se marca como DESINFECTANTE.

5. Se contamina la varilla de nuevo y se calienta con ayuda del mechero realizando movimientos rotatorios durante 15 segundos, se deja enfriar y seinocula el tercer tubo con caldo tioglicolato, el cual se marcara como ESTERILIZADA.

6. Posteriormente se contamina otra vez la varilla con la saliva y se inocula el último tubo con caldo tioglicolato, el cual se esteriliza en autoclave a 15 libras de presión por 15 minutos, a una temperatura de 120 ºC y se marcara como TESTIGO DE ESTERILIZACIÒN.

7. Por ultimo se colocan los 4 tubosutilizados dentro de la estufa incubadora que esta a 37º y se deja De 24 a 48 horas. Pasando este tiempo de observan los resultados que cada tubo manifestó.

Resultados Prueba de esterilización y desinfección.
TESTIGO DE CONTAMINACIÒN: El primer tubo contaminado con saliva presenta una gran cantidad de microorganismos, debido al proceso de contaminación.
DESINFECTANTE: El segundo tubo no muestrapresencia de microorganismos, debido a que la saliva estuvo en contacto con alcohol de 96º, lo cual no contribuyo a la proliferación de ellos.
ESTERILIZADA: El tercer tubo al pasar por un proceso de esterilización por medio de calor no muestra proliferación de microorganismos.
TESTIGO DE ESTERILIZACIÒN: El cuarto tubo a pesar de ser contaminado no muestra presencia de microorganismos, esto yaque paso por un proceso de esterilización en autoclave, lo cual impide su proliferación.

Prueba de esterilización.
1. Pese 1.2 g de gelosa nutritiva.
2. Vacíela dentro del matraz y agréguele 50 ml de agua destilada.
3. Disuelva el medio calentando la mezcla hasta que se observe transparente.
4. Marque con A y B do tubos de 13 x 100.
5. Del medio de cultivo de agar nutritivo, coloque 3 mlen cada uno de los tubos marcados con ayuda de la pipeta (tener cuidado de no quemarse), tápelos adecuadamente.
6. Tape la b oca del matraz con algodón envuelto en gasa y coloque un “gorro” de papel, márquelo con su número de equipo al igual que los tubos.
7. Introduzca el matraz y los tubos al autoclave previamente calentada.
8. Una vez que todos los tubos y matraces se encuentren en elautoclave, cierre y proceda con la técnica de esterilización.
9. Después de esterilizar el medio de cultivo sáquelo de autoclave con cuidado.
10. Los tubos se colocan sobre la pipeta, de tal forma que queden inclinados, deje solidificar.
11. Una vez solidificados, uno de los tubos destápelo y manténgalo así durante 10 minutos, transcurrido el tiempo tápelo.
12. Colóquelos dentro de la estufaincubadora que se encuentra a 37° y déjelos durante 24 a 48 horas.
13. Terminado el tiempo de incubación observe los resultados obtenidos.
14. Con el medio de cultivo que se encuentra en el matraz, vacié la mitad en cada una de las cajas petri (la base de la caja es mas pequeña que la tapa).
15. Tape las cajas y deje solidificar el medio de cultivo.
16. Cuando se solidifiquen, una de las cajas se...
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