LABORATORIO 3 Med

LABORATORIO Nº 3
MEDIOS DE CULTIVO - ESTERILIZACION
OBJETIVOS
1-Preparar y esterilizar el material de uso en el laboratorio microbiológico.
2- Aprender a manejar los aparatos comúnmente utilizados enesterilización.
3- Diseñar, elaborar y esterilizar medios de cultivo.
DESARROLLO PRÁCTICO
1. Preparación de un medio de cultivo a partir de sus componentes básicos.
Se preparará agar nutritivo cuyacomposición química es la siguiente:
- Extracto de carne
- Peptona
- ClNa
- Agar
- Agua destilada c.s.p.

3 g.
5 g.
8 g.
15 g.
1000 ml. pH: 7,3

Se pesan cada una de las drogas, se le agrega agua hastacompletar el volumen final una vez
disueltas, se toma el pH del medio y por último se le agrega el agar; este se disuelve por
calentamiento a baño maría. El medio así preparado se esteriliza yposteriormente se fracciona en
placas y en tubos estériles.
NOTA: Previo a la esterilización, el medio puede fraccionarse en tubos y esterilizarse ya
fraccionado.
2. Preparación de medios de cultivo apartir de medios comerciales.
1) Medio de Chapman (Selectivo y diferencial):
Extracto de carne
Polipeptona
ClNa
Manitol
Rojo fenol
Agua destilada

1g
10 g.
75 g.
10 g.
0,025 g.
1000 ml.

Es altamenteselectivo usado para el aislamiento y diferenciación de Staphylococcus
patógenos y pone de manifiesto la habilidad de S. aureus de fermentar el manitol. Es selectivo
debido a la concentración de ClNa(7,5%, aproximadamente 10 veces más que lo habitual) esta
inhibe la mayoría de microorganismos que no son Staphylococcus. La producción de ácido como
resultado de la fermentación del manitol por S. aureuslos hace diferencial, dando como resultado
colonias opacas rodeadas de 1 zona amarilla como consecuencia del viraje del indicador (rojo fenol)
de rosa amarillo.

2) Medio de Levine (EMB) (Selectivo ydiferencial):
Peptona
Lactosa
Fosfato dipotásico
Eosina
Azul de Metileno
Agar
Agua destilada

10 g.
10 g.
2 g.
0,4 g.
0,065 g.
15 g.
1000 ml

Es un medio diferencial recomendado para el aislamiento...