Lacelestina
Páginas: 5 (1016 palabras)
Publicado: 22 de marzo de 2010
INTRODUCCION
Entre los requisitos para el trabajo con microorganismos están los cultivos y la técnica aséptica. Dado la ubicuidad de los microorganismos y la existencia de ensoporas termoresistentes se han desarrollado varios procesos de esterilización, o sea de eliminación o destrucción de todo organismo vivo.
Así todo objeto esterilizado esta libre de organismos viables capaces dereproducirse. La destrucción de endosporas termoresistentes se realiza a temperaturas mayores de 100ºC, aplicada mediante vapor a alta presión, no alcanzables con el agua liquida.
La esterilización con vapor a presiones superiores a la atmosférica se logran en las autoclaves. Usualmente se utiliza para esterilizar medios de cultivo y soluciones a 121ºc, 15lb (1,2 atm) de presión por 15 – 20 minutos.Temperaturas mayores pueden ocasionar destrucción de los componentes de los medios de cultivos. Soluciones con antibióticos o vitaminas usualmente se esterilizan por filtración en membranas. Algunos medios requieren la esterilización por separado de fuentes de carbono, para evitar caramelizacion del medio y reacciones que inhiban el crecimiento de los microorganismos.
OBJETIVOS
* Lavar, preparar yenvolver correctamente el material que se someterá a esterilización.
* Seleccionar los métodos de esterilización adecuados para las diversas necesidades de laboratorio de Microbiología.
* Comprobar la efectividad del proceso de esterilización.
* Elaborar adecuadamente los medios de cultivo deshidratados y por componentes.
* Envasar los medios de cultivo de manera adecuada en losdiferentes recipientes de acuerdo a su uso.
* Relacionar la composición de los diversos medios de cultivo con sus características y aplicaciones.
MATERIALES Y EQUIPOS
* Agua destilada
* Medios deshidratados o sus componentes
* Agar nutritivo deshidratado
* Erlenmeyer o balones
* Cajas de petri esterilizadas
* Tubos de ensayo
* Pipetas
* Vaso de precipitado
* Cilindrograduado
* Papel kraft
* Espátula
* Guantes de cuero
* Olla esmaltada
* Cilindro de vidrio
* Manuales de medios de cultivo de casas comerciales
* Autoclave
* Balanza
* Estufa o plancha con agitador magnético.
METODOLOGIA
Los medios de cultivos de pueden preparar a partir de sus componentes o de medios deshidratados. Los volúmenes a preparar se calculan para cajas ytubos bacteriológicos estándar. Así
Tubos de caldo cajas de petri tubos con medio inclinado
AGAR NUTRITIVO
Para la preparación del medio solido procedimos a pesar en la balanza 0.195gr de agar de patata – glucosa se adiciono en un erlenmeyer y se le agrego 50ml de agua destilada hasta lograr su respectiva homogenización, luego en dos tubos de ensayose agrego 10ml de la solución a cada uno y se taparon con papel aluminio, al resto de la solución se tapo con papel aluminio, y se llevo a autoclave al igual que las cajas de petri.
CALDO NUTRITIVO
Para la preparación 0.8gr de caldo nutritivo se adiciono en un erlenmeyer y se le agrego 50ml de agua destilada hasta lograr su respectiva homogenización, luego en dos tubos de ensayo se agrego 10mlde la solución a cada uno y se taparon con papel aluminio, al resto de la solución se tapo con papel aluminio, y se llevo a autoclave.
RESULTADOS
Agar patata –glucosa
Preparación: suspender 39g en 1 litro de agua desmineralizada calentando en un baño de agua hirviendo o en corriente de vapor, tratar pH: 5.6+/- 0.2 a 25ºC.
Composición típica: (g/litro) infusión de patata 4.0 (infusión de 200gde patatas); D (+)-glucosa 20.0; agar-agar 15.0.
Caldo nutritivo
DEV Caldo- triptófano para microbiología
Preparación: suspender 16g en 1 litro de agua desmineralizada, introducir en tubos; tratar en autoclave (20 minutos a 115ºC) PH7.2+/- 0.2 a 25ºC.
Composición típica: (g/litro) peptona de carne...
Entre los requisitos para el trabajo con microorganismos están los cultivos y la técnica aséptica. Dado la ubicuidad de los microorganismos y la existencia de ensoporas termoresistentes se han desarrollado varios procesos de esterilización, o sea de eliminación o destrucción de todo organismo vivo.
Así todo objeto esterilizado esta libre de organismos viables capaces dereproducirse. La destrucción de endosporas termoresistentes se realiza a temperaturas mayores de 100ºC, aplicada mediante vapor a alta presión, no alcanzables con el agua liquida.
La esterilización con vapor a presiones superiores a la atmosférica se logran en las autoclaves. Usualmente se utiliza para esterilizar medios de cultivo y soluciones a 121ºc, 15lb (1,2 atm) de presión por 15 – 20 minutos.Temperaturas mayores pueden ocasionar destrucción de los componentes de los medios de cultivos. Soluciones con antibióticos o vitaminas usualmente se esterilizan por filtración en membranas. Algunos medios requieren la esterilización por separado de fuentes de carbono, para evitar caramelizacion del medio y reacciones que inhiban el crecimiento de los microorganismos.
OBJETIVOS
* Lavar, preparar yenvolver correctamente el material que se someterá a esterilización.
* Seleccionar los métodos de esterilización adecuados para las diversas necesidades de laboratorio de Microbiología.
* Comprobar la efectividad del proceso de esterilización.
* Elaborar adecuadamente los medios de cultivo deshidratados y por componentes.
* Envasar los medios de cultivo de manera adecuada en losdiferentes recipientes de acuerdo a su uso.
* Relacionar la composición de los diversos medios de cultivo con sus características y aplicaciones.
MATERIALES Y EQUIPOS
* Agua destilada
* Medios deshidratados o sus componentes
* Agar nutritivo deshidratado
* Erlenmeyer o balones
* Cajas de petri esterilizadas
* Tubos de ensayo
* Pipetas
* Vaso de precipitado
* Cilindrograduado
* Papel kraft
* Espátula
* Guantes de cuero
* Olla esmaltada
* Cilindro de vidrio
* Manuales de medios de cultivo de casas comerciales
* Autoclave
* Balanza
* Estufa o plancha con agitador magnético.
METODOLOGIA
Los medios de cultivos de pueden preparar a partir de sus componentes o de medios deshidratados. Los volúmenes a preparar se calculan para cajas ytubos bacteriológicos estándar. Así
Tubos de caldo cajas de petri tubos con medio inclinado
AGAR NUTRITIVO
Para la preparación del medio solido procedimos a pesar en la balanza 0.195gr de agar de patata – glucosa se adiciono en un erlenmeyer y se le agrego 50ml de agua destilada hasta lograr su respectiva homogenización, luego en dos tubos de ensayose agrego 10ml de la solución a cada uno y se taparon con papel aluminio, al resto de la solución se tapo con papel aluminio, y se llevo a autoclave al igual que las cajas de petri.
CALDO NUTRITIVO
Para la preparación 0.8gr de caldo nutritivo se adiciono en un erlenmeyer y se le agrego 50ml de agua destilada hasta lograr su respectiva homogenización, luego en dos tubos de ensayo se agrego 10mlde la solución a cada uno y se taparon con papel aluminio, al resto de la solución se tapo con papel aluminio, y se llevo a autoclave.
RESULTADOS
Agar patata –glucosa
Preparación: suspender 39g en 1 litro de agua desmineralizada calentando en un baño de agua hirviendo o en corriente de vapor, tratar pH: 5.6+/- 0.2 a 25ºC.
Composición típica: (g/litro) infusión de patata 4.0 (infusión de 200gde patatas); D (+)-glucosa 20.0; agar-agar 15.0.
Caldo nutritivo
DEV Caldo- triptófano para microbiología
Preparación: suspender 16g en 1 litro de agua desmineralizada, introducir en tubos; tratar en autoclave (20 minutos a 115ºC) PH7.2+/- 0.2 a 25ºC.
Composición típica: (g/litro) peptona de carne...
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