Lavado De Ritrocitos

USPENSION DE HEMATIES

Material:

Tubos cónicos para centrifuga

Pipetas Pasteur

Varilla de vidrio

Embudo

Frasco lavador de plástico

Gradillas

Vasode precipitado

Espátula

Matraz aforado con tapón

Micro pipeta automática

Vidrio de reloj

Parafilm

Balanza electrónica

Sangre entera

Cloruro sódico +agua destilada (suero fisiológico)

Preparación del suero fisiológico:

Preparamos una disolución de suero al 9%. Haremos 0´5 L de disolución.

Pesamos 4´5 g deNaCl en la balanza, sobre el vidrio de reloj:

100 ml --------------- 9g

500 ml ---------------- x , X= 4´5 g

Echamos los 4´5 g en un vaso de precipitado y mezclamoscon un poco de agua destilada. Vertemos la mezcla en un matraz aforado de 0´5 L, aclaramos el vaso de precipitado con agua, para asegurarnos que todo el soluto ha sidovertido al matraz. Ahora enrasamos con agua destilada. Para mayor precisión en el enrase, una vez estemos cerca de la línea de enrase, terminaremos echando gota a gota elagua destilada hasta la línea de enrase. Mezclamos y etiquetamos la disolución.

Técnica:

En un tubo de ensayo, echamos una parte de sangre y 4 de suero (hay que echarlopoco a poco, ya que se pueden romper los hematíes)

Tapamos con parafilm el tubo de ensayo y centrifugamos 3 minutos a 3000 r.p.m para proceder al lavado de hematíes.Una vez centrifugados los glóbulos rojos, con una pipeta pasteur desechamos el sobrenadante.

Realizamos el lavado tantas veces como sea necesario hasta obtener unsobrenadante limpio(transparente)

una vez conseguido, haremos una suspensión de hematíes de 5 ml al 10%

100 ------------ 5

10 ------------ x , x= 0´5 ml de GR lavados