Mantenimiento y Preservación De Microorganismos

Mantenimiento y preservación de microorganismos
Gran parte de los estudios en microbiología depende de la capacidad de cultivar y mantener microorganismos en un laboratorio, y esto es sólo posible si se dispone de los medios de cultivo adecuados. (Prescott, 2002)
El mantenimiento de los microorganismos consiste en la conservación de ellos y de sus características por largos periodos.(Hernández)
A través de los años, se han desarrollado varios métodos de conservación de microorganismos, que se basan en la reducción de su actividad metabólica. La selección del método de conservación depende de varios factores, entre los que se pueden mencionar:
* La susceptibilidad del microorganismo (al proceso de conservación).
* La facilidad con la que puedan ocurrir cambios genéticos en lacepa.
* El numero de muestras por conservar.
* El costo del proceso de conservación.
* El periodo durante el cual se desea conservar el microorganismo.
* El tipo de equipo disponible.
* La probabilidad de contaminación que exista en el medio.(Hernández)
Los objetivos de la conservación de los cultivos podrían resumirse en los siguientes aspectos:
a) Preservar la purezagenética del cultivo sin pérdida de ninguna de sus propiedades bioquímicas.
b) Preservar los niveles de su productividad inicial (que durante el tiempo de conservación sobrevivan al menos el 70-80% de las células).
c) Lograr que el cultivo sea transportado y manejado con facilidad. (García)
El requerimiento de que las células tienen que permanecer genéticamente estables es el motivo por elcual existen varios métodos de conservación para los microorganismos, y ninguno de ellos es de utilización general. Vamos a resumir estos métodos agrupándolos en tres apartados, que son: Métodos de elección o de conservación a largo plazo, métodos a mediano alternativos y métodos restringidos. (García)
MÉTODOS DE ELECCIÓN O DE CONSERVACIÓN A LARGO PLAZO
Son los mejores porque en ellos se paralizael crecimiento de las células microbianas, pero éstas no han muerto. Así se garantiza al máximo la estabilidad genética, por evitarse la aparición de generaciones sucesivas. Aún así no se puede descartar algún cambio originado por el método preparatorio en sí mismo. Los métodos de conservación pertenecientes a este grupo son dos: Congelación y liofilización. (García)
Técnicas que minimizan almáximo el riesgo de cambio genético en las células y las mantienen viables por 10 años o más. Sin embargo el elevado costo de los equipos que emplean estos métodos dificulta su implementación en muchas instituciones, las que en ocasiones hacen uso del servicio de mantenimiento y conservación mediante estos, los cuales brindan colecciones de cultivos reconocida. (García)
a) Conservación porcongelación.
Se congelan las células en suspensión en un líquido con un agente crioprotector y se guardan a temperaturas inferiores a cero grados centígrados, con lo que el agua se congela. De esta forma, al no disponer las células de agua en forma líquida, no hay crecimiento. Cuando se quiere trabajar con las células así conservadas, se recuperan subiendo la temperatura. Este es el mejor método deconservación desde todos los puntos de vista, pero tiene el inconveniente de requerir aparatos especiales, y además existe el peligro de que algún fallo del sistema produzca una subida no deseada de la temperatura durante el almacenamiento. También resulta ser el método más molesto para realizar el envío de las cepas. Los cuatro factores que influyen en la viabilidad y estabilidad de las célulasconservadas por este método son los siguientes:
1 Edad de las células: En la mayoría de los casos conviene utilizar células maduras del inicio de la fase estacionaria de la curva de crecimiento, pero cuando se trate de organismos que presenten en su ciclo vital algún estado que les prepare para la resistencia a condiciones adversas, es preferible alcanzar este estado. Esto sucede en el caso...