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TRABAJO PRACTICO DE LAVORATORIO

1ª parte: Preparación de medios de siembra de bacterias en medios de cultivos

Objetivos: Preparación de medios de cultivos, técnicas de cultivo, medios de esterilización.
Introducción: Un medio de cultivos es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.La mayoría de medios de cultivos se comercializan en forma de liofilizados que es preciso rehidratar.
Los constituyentes habituales de los medios de cultivos son: agar, azucares, extractos, peptonas, fluidos corporales, sistemas amortiguadores, indicados de pH, agentes reductores, agentes selectivos.
Tipos de medios de cultivos:
Por su consistencia: líquidos (se denomina caldo y se prepara entubos de ensayos) y solidos (contiene un agente solidifícate entre sus componentes).
Pos su composición: medios generales, medios de enriquecimiento, medios selectivos medios diferenciales
Materiales:
1- Agar 36 g/l; 150ml 8- Tubo de ensayo
2- Caldo nutritivo 9- Gradilla
3- Agua 10- Agua destilada
4- Matraz de Erlenmeyer 11- Placa de Petri
5- Aluminio
6- Mechero7- Pipeta rota




Procedimiento: Se debe prepara un medio liquido para poder cultivas las muestras, se lo prepara con caldo nutritivo. Primero pesamos y rehidratamos el caldo (según las indicaciones del proveedor), luego se lo coloca dentro del matraz de Erlenmeyer, y se los tapas con aluminio. Se lo coloca en al fuego hasta que este hierva. Una vez que la solución este preparada lodistribuimos en los tubos de ensayo con una pipeta. Luego colocamos los tubos de ensayo en la gradilla y lo guardamos en la heladera a 4ºC así se conservan.
Se debe prepara un medio solido para poder cultivar las muestras. Primero se pesa la cantidad establecida del medio, y colocar agua destilada para rehidratarlo. Luego se traslada la solución dentro del matraz de Erlenmeyer, tapamos la bocacon papel aluminio y lo ponemos al fuego hasta que este hierva. Dejamos enfriar un poco, y luego los distribuimos en placas de Petri. Para terminar se debe dejar que la preparación se solidifique y se conserva a 4ºC en la heladera


2ª parte: Toma y siembra en medios líquidos y solidos

Objetivos: Tomar muestras de bacterias de distintas partes de la escuela y sembrarlas en nuestros medios decultivos; diseños de tomas de muestras; técnicas de cultivo; medios de esterilización.
Materiales:
1- Ansa 11- Mesa de biblioteca
2- Soluciones liquidas y solidas 12- Sala de profesores
3- Mesa de profesores (aula) 13- Encendedor
4- Mechero 14- Preceptoria
5- Agua de pecera 15- Ventana del patio
6- Kiosco 16- Picaporte del aula
7- Mesa de laboratorio
8- Tecladode la sala de computación
9- Baño de mujer
10- Baño de hombre



Procedimiento: Medio liquido
Debemos trasladar las muestras que se deben recoger al medio liquido, para lograr eso primero se debe quemar el ansa con el encendedor al rojo vivo, para matar todas las bacterias intrusas, luego se deja enfriar un poco colocando en el borde de los tubos de ensayo. Para recoger las muestras primerose debe colocar el ansa, ya esterilizado, en la solución liquida; luego se debe pasar el ansa por el lugar donde el profesor indique para recoger las muestras, volvemos a meter el ansa (ahora con las bacterias nuevas) en la solución. Esto se debe repetir a la hora de recoger todas las demás muestras.
Una vez sembrado en el medio liquido, se debe colocar los tubos de ensayo en las estufa decultivo a 36ºC por 28 hs; luego son puestas en las heladera a 4ºC para que el crecimiento se mantenga, quedando en estado latente.
Medio solido
Debemos pasar las bacterias de la solución liquida a una solución solido. Primero se debe esterilizar en ansa quemándolo al rojo vivo, luego se debe enfriar apoyándolo contra la pared de la placa y tocando apenas la solución solido. Se coloca el ansa...