Medios Dde Cultivo
Generalidades
Prof. Nino Calabrese V.
Como ya se conoce la nutrición, esto permite que se pueda cultivar los M.O. Los M.O. tienen requerimientos de macro y micronutrientes, pero varía en la captación y cantidad que necesiten ( distintas “recetas”) ½ de cultivo: Solución en la que están presentes todas las sustancias necesarias para el crecimiento de undeterminado M.O., pudiendo ser acuoso o gel.
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Clasificación
1) ½ complejo o indefinido: Composición química exacta se desconoce. Rico nutricional%, indefinido química% Se pretende buen crecimiento bacteriano. Contienen fuentes variadas de C y N, sales minerales y micronutrientes. No tiene un control nutricional y preciso Ej. componentes: extrac. decarne, levadura, caseína, etc.
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2) ½ sintético o definido: Composición química concreta de distintas sustancias puras, org. y/o inorg., depende de bacteria a cultivar 3) ½ semisintético: Mezcla de 1) y 2), algunas sustancias con cantidad conocida y otras de composición indefinida. De los 3 anteriores; 2 versiones:
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1.- ½ líquidos 2.- ½ sólidos: Se añade al ½ líquido soluc. nutritiva coloide en gel que da consistencia a la soluc. En 1ªs épocas se usaba como gelificante la gelatina, pero: Funde a 25ºC, por sobre ésta se licua. Muchas bacterias tienen gelatinasa, hidrolizan gelatina.
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Más usado el Agar-Agar ( de algas rojas) Se ha purificado usando agarosa (polisacarido) usado en ½definidos para evitar contaminantes Agar luego de gelificado, no funde hasta cerca de 100ºC (mas usado en bacterias mesófilas) Para bacterias quimioautotrofas, se usa gelificante inorg. silicagel.
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½ selectivo: Seleccionan un tipo de M.O. Llevan inhibidores del crecimiento de otras bacterias. Ej: cristal violeta inhibe crec. de G+
½diferenciales: Permite distinguir a simple vista 2 ó más tipos de M.O. en función del comportamiento con respecto a algún nutriente del ½, normal% viraje de color de sust. indicadora en el ½ . Ej: Agar sangre (5% sangre cordero)revela hemólisis de ciertas bacterias.
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½ selectivos y diferenciales
Ej: Agar Mac Konkey. Color: rosado y transparente TieneLactosa, Peptonas, Sales biliares, Cristal violeta, Colorante vital rojo neutro, otros. Selectivo: Cristal violeta inhibe muchas G+ Sales biliares inhiben muchas GPero Enterobacterias evolutiva% adaptadas a sales biliares en su hábitat.
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Diferencial: Lactosa: bacterias pueden o no fermentarlas c/ prod. de ác.,por lo que se ven 2 tipos de Enterobacterias:Lac+/LacLac+: fuente de C lactosa, al ½ gran cantidad de ác.org., colonias y alrededor color rojo intenso (viraje rojo neutro) Lac-: fuente de C las peptonas, las desaminan, excretan NH4+, alcaliniza el ½ , rojo neutro vira a amarillo.
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Enriquecimiento: Téc. que permite desarrollo de un grupo de M.O. desde muestra con gran variedad de M.O.; se les dan condiciones para quecompitan y a las que éstas condiciones sean mas favorables serán los predominantes. ¿ Qué vemos crecer? Crecimiento de cels.(se acumulan), visibles a simple vista: COLONIAS
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Colonias: Densidad alta: 10↑7 cels. para colonias de aprox. 5 mm. Se acumulan, ya que en ½ sólido bacterias no pueden dispersarse y éste ½ permite aporte continuo denutrientes y eliminación de desechos por difusión. Con éste crecimiento se pueden hacer det. taxonómicas (carac. de colonias): Tamaño-forma gral.,forma de bordes, aspec. de superficie y elevación, color, consistencia, etc.
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Pruebas diferenciales bioquímicas
Existen diferentes pruebas para poder diferenciar las distintas especies de...
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