Medios De Cultivo

MEDIOS DE CULTIVO: PREPARACIÓN Y CLASIFICACIÓN

Medios de cultivo: preparación y clasificación

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ÍNDICE
1.1-. Preparación de un medio de cultivo 1.2-. Conservación de los medios de cultivo 1.3-. Desecho de los medios de cultivo 1.4-. Clasificación de los medios de cultivo 1.5-. Errores típicos en la preparación de un medio de cultivo 1.6-. Inhibidores en los medios de cultivoy función 1.7-. Factores de crecimiento en los medios de cultivo 1.8-. Bibliografía

Lidia Fernández Suárez

22.10.2012

Medios de cultivo: preparación y clasificación 1.1 PREPARACIÓN DE UN MEDIO DE CULTIVO:

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Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos.Estos medios son esenciales en el laboratorio de microbiología por lo que un control en su fabricación, preparación, conservación y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos. En los laboratorios de microbiología se utilizan diferentes tipos de medios de cultivo que pueden ser preparados en forma líquida o en forma sólida. Usualmente para preparar unmedio sólido, se parte de un medio líquido al que se le añade un agente solidificante como el agar, la gelatina o la sílicagel. Los medios de cultivo se pueden preparar en el laboratorio a partir de cada uno de sus constituyentes básicos, o por simple rehidratación de productos asequibles comercialmente (medios de cultivo deshidratados). Generalmente se prefiere el uso de los medios de cultivodeshidratados porque, además de simplificar el trabajo, con ellos se tiene mayor probabilidad de obtener resultados reproducibles. Para su preparación se deben tener en cuenta los siguientes aspectos: ● Prepararlos sólo a partir de productos que provengan de fabricantes o proveedores que suministren productos de calidad. ● Utilizar agua destilada o desmineralizada con una calidad microbiológica yfisicoquímica adecuada. ● Utilizar materiales de vidrio bien lavados y enjaguados con agua destilada o desmineralizada. ● Controlar el tiempo y la temperatura recomendada durante su esterilización. Nunca se deben exceder las condiciones sealadas por el fabricante. ¿Cómo se preparan los medios de cultivo?

● Pesar los medios de cultivo.
Bacterias: 23 gramos de agar nutritivo para 1 litro de aguadestilada. Hongos: agar, dextrosa y papa y extracto de levadura para 1 litro de agua destilada.

● Colocar el medio de cultivo en polvo en un matraz erlenmeyer y agregar agua destilada. ● Calentar en la parrilla de agitación hasta que el medio esté totalmente cristalino. ● Retirar de la parrilla y colocar un tapón hecho con algodón envuelto en gasas. El tapón debe
quedar fijo pero no apretado.Lidia Fernández Suárez

22.10.2012

Medios de cultivo: preparación y clasificación ● Colocar el medio en el autoclave y esterilizar a 121ºC durante 20 minutos.

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● Pasados los 20 minutos sacar el medio de cultivo y dejar enfriar un poco. OJO: en el caso
del medio de cultivo para hongos dejar enfriar hasta los 45ºC y agregar el antibiótico, es decir, la gentamicina (ampolleta).De la gentamicina necesitamos 1 mL para un litro de medio.

● Vaciar el medio de cultivo en placas de petri dentro de un campo estéril. Vaciar en cada
placa 30 mL aproximadamente.

1.2 CONSERVACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:
Los medios de cultivo deshidratados se deben almacenar en envases sellados bajo las condiciones que señale el fabricante. Generalmente se almacenan en un lugar fresco(entre 15 y 25ºC), con poca humedad y protegidos de la luz solar directa . Nunca se deben almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra fuente de calor o vapor. Los medios de cultivo deshidratados son higroscópicos. Cuando los envases de estos medios de cultivo deshidratados son abiertos para su uso inicial, se debe tener la precaución de cerrarlos tan pronto como sea posible y mantenerlos bien...