Mesofilas

CBTis. No.103
Alumno: Resendiz Guerrero Juan Adolfo
Semestre: 4 Grupo: “A”
Especialidad: Lab. Químico

Modulo: Realizar análisis industriales fisco-químicos, microbiológicos y toxicológicos de acuerdo a la normatividad vigente.

Submodulo III: Análisis de aguas y alimentos por métodos microbiológicos.

NOM-113-SSA1-1994

Profesora: Gabriela Patricia Sulvarán Robles

Cicloescolar: Febrero – Julio 2011
Cuenta de coliformes totales en placa.
Objetivo:
El objetivo de esta práctica es aplicar la NOM-113-SSA1-1994 la cual establece el método de análisis microbiológico para determinar el número de colifomes totales en placa presentes productos alimenticios en este caso la muestra fue agua o el jugo del trolelote natural.
Fundamentación:
Mifundamentación sobre esta práctica es sobre el método de la NOM-113-SSA1-1994 que nos permite determina el numero de microorganismos coliformes presentes en alguna muestra la cual fue el agua con la que cosen el trolelote utilizando un medio selectivo.
Se iso uso de la NOM-113-SSA1-1994 para determinar el número de coliformes totales en placa usando el agar selectivo rojo-violeta bilis lactosa que nospermite observar el numero de coliformes en el puesto que es un medio selectiva como ya avía mencionado.
La norma nos estableció el procedimiento a seguir, que agar usar para la determinación de coliformes el cual fue agar rojo-violeta bilis lactosa el cual nos dice que forma bacterias 35 °C durante un tiempo de 24 hrs. Nosotros ya sabemos que los coliformes totales fermentan lactosa por esoes que se ocupado este agar porque contiene lactosa uno de los los cambios notorios que nos podemos dar cuenta como analistas es el cambio que hay en el agar pues cambia de color, varia el pH y produce gas y ácidos orgánicos que genera la bacteria
Todo el procedimiento tiene algo en común con otras prácticas realizadas y así nos podemos dar cuenta del crecimiento bacteria en la muestra.
Enesta misma practica empleamos otra que fue la NOM-110-SSA1-1994 que es la que nos estable las diluciones que es el principio de la practica.
Introducción:
La denominación genérica coliformes designa a un grupo de especies bacterianas que tienen ciertas características bioquímicas en común e importancia relevante como indicadores de contaminación del agua y los alimentos .
Agar rojo-violetabilis lactosa: En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano, las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH.
Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el medio yproducen un viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo púrpura, de 1 a2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada.

Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
  Extracto de levadura | 3.0 | Suspender 41,5 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar, calentando aebullición 1 o 2 minutos. Enfriar a 45°C y verter en placas. Una vez preparado debe usarse de inmediato. NO AUTOCLAVAR. |
  Peptona | 7.0 | |
  Sales biliares | 1.5 | |
  Lactosa | 10.0 | |
  Cloruro de sodio | 5.0 | |
  Agar | 15.0 | |
  Rojo neutro | 0.03 | |
  Cristal violeta | 0.002 | |
pH final: 7.4 ± 0.2 |

Siembra
-Para recuento bacteriano: sembrar en profundidad 1mlde la muestra directa o de la dilución apropiada, agregar aproximadamente 12-15 ml de medio de cultivo enfriado a 45 ºC, agitar por rotación y dejar solidificar.
Luego, agregar una sobre capa de medio de cultivo para crear condiciones anaeróbicas de manera que se evite el crecimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de azúcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus...