Metodos De Control

11 METODOS DE CONTROL DE MATERIA PRIMA Y PRODUCTO TERMINADO.
Valoración de celecoxib por HPLC.

Condiciones de trabajo: La cromatografía fue desarrollada bajo condiciones ambientales conequipo HPLC Shimadzu, detector programable UV-visible de longitud de onda variable, horno de columna SPD -10AVP y un sistema de control SCL-10AVP.Las muestras (20 ul) se inyectaron por medio de uninyector Reodina provisto con un loop de 20 ul. La instrumentación fue controlada por medio de un software clase VP 5.032.
Desarrollo del método: La cromatografía liquida de alta performance se llevo acabo en fase reversa en columna C18 con metanol-agua 75:25(% v/v) como fase móvil y un caudal de 1.25 ml/min. La detección fue desarrollada a 250 nm y el pico agudo para Celecoxib fue obtenido a untiempo de retención de 4.8 +/- 0.01 min.
No se utilizo estándar interno porque no se involucro ningún paso de extracción o separación. De varios disolventes y mezclas de disolventes investigadosmetanol-agua se encontró que proporciono picos agudos y bien definidos con muy buena simetría( 1.25) y tiempo de retención bajo(4.8 min)(FIG 1).Con acetonitrilo-agua 75:25 como fase móvil, el tiempo deretención fue de 5.9 min(FIG 2),y la forma del pico y la sensibilidad fueron pobres. Acetonitrilo fue también más costoso que el metanol. Metanol-agua 95:05(FIG 3) y metanol-agua 50:50(FIG 4),noproporcionaron picos agudos y bien definidos, y otras fases móviles probadas o bien dieron como resultado una sensibilidad mucho menor o no dieron picos bien definidos en un tiempo corto, por ello es queno fueron consideradas.
La decisión final sobre la composición de la fase móvil, se hizo sobre la base de: forma de pico (área del pico, asimetría, factor de asimetría),el tiempo requerido para elanálisis y el costo del solvente, y metanol-agua 75:25(%v/v) fue seleccionada como la fase móvil optima. Bajo estas condiciones, el tiempo de retención y el factor de asimetría fue 4.8+/-0.01 min y...