Metodos De Cultivo Micro

Métodos de cultivo.
Medios de cultivo. Son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. Son esenciales en el Laboratorio de Microbiología por lo que un control en su fabricación, preparación, conservación y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos(EcuRed).

Ingredientes de los medios de cultivo
Agua
Bases nutritivas
1. Peptonas, hidrolizados y digeridos
2. Extractos, infusiones y dializados
Carbohidratos
1. Azúcares
2. Agua y derivados
3. Almidones
4. Otros
Sales Minerales
1. Macroelementos (fósforo, azufre, sodio, cloro, hierro y otros)
2. Microelementos (zinc, cobre y otros)
Colorantes e indicadores
Factores de crecimiento
1. Vitaminas
2.Proteínas
3. Otros
Otros
Antibióticos y lípidos
























Materiales y equipo de laboratorio.













































































Equipos de laboratorio
Autoclave






























Esterilización de materiales y medios de cultivo

Introducción
La esterilización es un método de eliminación total de todo tipo de organismo queasegura la ausencia absoluta de cualquier forma viviente. Una esterilización deficiente o manipulación incorrecta de materiales y medios de cultivo conlleva a contaminaciones, resultados erróneos o pérdida del material biológico. Por ello, se requieren buenas prácticas de laboratorio para su adecuado manejo.
La esterilización por calor seco o húmedo son los métodos que se utilizan con mayor frecuenciaen el Laboratorio de Microbiología. El calor seco destruye a los microorganismos por oxidación, por ejemplo, al exponerlos directamente a la flama de un mechero o en horno a 150-180°C durante 2 horas. Estos métodos se aplican en la esterilización de asas de inoculación y para todo tipo de material de vidrio y quirúrgico.
Los procesos con calor húmedo afectan la estabilidad de estructurascelulares y proteínas; se aplican para esterilizar medios de cultivo, soluciones termoestables, materiales de vidrio y cultivos bacterianos que se desechan. El equipo de uso común es la autoclave, que utiliza vapor de agua a presión (15 lb/in ); con esta presión el material alcanza una temperatura de 121 °C y si se mantiene durante 15 minutos se asegurará la inactivación de endosporas, que son lasestructuras bacterianas más resistentes al calor.
Como en los estudios de microbiología se requiere la esterilización de espacios, superficies y materiales de naturaleza diversa (plástico, vidrio, instrumentos, medios de cultivo, cultivos para desechar, etc.), hay diferentes métodos que se aplicarán de acuerdo con el tipo de materiales requeridos, tal como se observa en la Tabla.

MaterialesProcedimientos
Se envolverá las cajas Petri y pipetas con papel estraza, así como elaborar tapones y capuchones para tubos y matraces.

Preparación del material de vidrio y medios de cultivo

1. Se Lavara en forma respectiva el material de vidrio y enjuagar con abundante agua corriente.
2. Se deberá de escurrir el exceso de agua y enjuagar el material con agua destilada. Dejarescurrir el material sobre una toalla o papel de envolver.
3. Se Prepararan 200 mL de CN en un matraz Erlenmeyer de 500 mL y ajustar el pH a 6.5-7.0 con un potenciómetro, agregando con una pipeta Pasteur poco a poco solución de HCl 0.1M o solución de NaOH 0.1M en caso de que el pH sea más alcalino o ácido respectivamente. Vaciar 5 mL en cuatro tubos de cultivo con tapón de rosca que secerrarán sin llegar al tope.
4. Se deberá de preparar agar nutritivo (AN) agregando 2.7 g a los 180 mL del CN restante (15 g/L)
5. Se calentara el medio en una parrilla con agitación constante hasta ebullición (cuidar que no se proyecte) y vaciar 5 mL de medio en cuatro tubos con tapón de rosca. Enjuagar de inmediato la pipeta para evitar que se solidifique el agar.
6. Se deberán de reparar 200 mL de...