Metodos De Identificacion De Microorganismos

Métodos para la identificación de microorganismos en agua y productos lácteos
Análisis microbiológico del agua Son los procedimientos de laboratorio que se efectúan a una muestra de agua para consumo humano para evaluar la presencia o ausencia, tipo y cantidad de microorganismos.
METODOS DE IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS EN AGUA:

1.-Recuento directo de bacterias al microscopio
Es unatécnica para determinar o recontar el número total de organismos de una muestra: Se utilizan cámaras de recuento (Cámara de Petroff-Hauser) y visualización al microscopio. Es un método rápido del número total de células de una muestra pero no distingue entre viables o no viables.

MICROORGANISMOS QUE IDENTIFICA:
* Escherichia Coli
* Campylobacter jejuni
* Yersinia enterocolitica2.-Lactosado Caldo. (Salmonella spp. en agua, productos lácteos, etc.)
Procedimiento:
Referirse a los procedimientos y Métodos Estándar para la detección de coliformes en alimentos, aguas,productos lácteos y productos farmacéuticos.
.Después de incubar a 35 °C por 18 a 24 horas, examinar en los tubos la presencia de turbidez y formación de gas en la campana de Durham.
La turbidez y presencia degas en cualquier cantidad, es una prueba presuntiva positiva de la presencia de coliformes en la muestra.
El resultado deberá ser confirmado con las pruebas adicionales recomendadas por los Métodos Estándar.
MICROORGANISMOS QUE IDÉNTICA:
* Salmonella spp

3._Técnica de recuento en placa por siembra en superficie.
Procedimiento:
Marcar los 6 tubos de solución salina con las diluciones10-1, 10-2,…….10-6
Utilizando la pipeta de 1 ml con punta estéril, transferir asépticamente 0.5 ml del cultivo de E. coli a un primer tubo de solución salina estéril de 4.5 ml. (dilución 10-1). Retirar la punta y echarla al contenedor.
Mezclar la suspensión con un vortex durante unos segundos
Con una nueva punta de pipeta estéril, transferir 0.5 ml al siguiente tubo de dilución (dilución 10-2).Retirar la punta y echarla al contenedor.
Repetir el paso anterior hasta obtener la dilución 10-6 Siembra en placa.
Marcar las placas con las tres últimas diluciones 10-4, 10-5, 10-6 (2 placas por dilución). Comprobar que la superficie de las placas está bien seca.
Cambiar el volumen de la pipeta a 0.1 ml.
Tomar una punta de pipeta estéril y transferir 0.1 ml de cada una de las tres últimasdiluciones a placas de TSA Esterilizar la espátula de Driglasky impregnándola en alcohol, escurrir el exceso de alcohol y pasar por la llama del mechero.
Sembrar la dilución sobre la superficie de la placa rotando y esparciendo la muestra en todas las direcciones.
Incubar las placas en posición invertida a 37ºC durante 24-48 horas.
4._ Recuento de Microorganismos en el Agua:
PROCEDIMIENTO:Preparar tres placas de cada medio de cultivo para cada dilución (de la 10-2 a 10-4) de alimento.
Depositar en cada placa 0,1 ml de la dilución correspondiente.
Distribuir uniformemente sobre la superficie del medio de cultivo con espátula de
Drigalski. Incubar a la temperatura y tiempos indicados.
Determinar el número de unidades formadoras de colonias por gramo de alimento contando lasplacas que contengan de 30 a 300.

MICROORGANISMOS QUE IDENTIFICA:
* Hongos
* mesofilos totales
* enterobacterias)
5._Filtración por membrane (FM)
Filtrar un volumen determinado de la muestra de agua a analizar a través de una membrana de 0.45 Incubar en placas con medios de cultivo selectivos. Realizar el recuento.
Paso 1: En condiciones asépticas, se utiliza un filtro demembrana de 0,45 µm de tamaño de poro que se coloca en el portafiltros de la rampa de filtración de vacío. Método Filtración por Membrana
Paso 2: Se coloca el embudo del filtro previamente esterilizado. Método Filtración por Membrana
Paso 3: Se inicia la filtración de los 100 mL de agua. Método Filtración por Membrana
Paso 4: Una vez finalizado, se recoge el filtro con unas pinzas estériles y...