Mi Material De Apoyo
Páginas: 8 (1926 palabras)
Publicado: 6 de julio de 2012
Universidad Autónoma de Chiriquí
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas
Escuela de Farmacia
Informe de Bioquímica
Pertenece a:
Eynar Toruño
Profesora:
Dayli Acosta
Segundo año
II Semestre
Año
2011
Experimento 6
Estudio de Inhibición de la Fenoloxidasa de la papa
Objetivos
1. Determinar la actividad enzimática de la fenoloxidasa presente en extractos depapa.
2. Calcular la Km de la enzima de los datos de actividad enzimática, frente a diferentes concentraciones de sustrato.
3. Estudiar el tipo de inhibición que ejerce el ácido benzoico sobre la actividad de la fenoloxidasa de la papa.
Marco Teórico
Las enzimas son catalizadores muy potentes y eficaces, químicamente son proteínas. Como catalizadores, las enzimas actúan en pequeñacantidad y se recuperan indefinidamente. No llevan a cabo reacciones que sean energéticamente desfavorables, no modifican el sentido de los equilibrios químicos, sino que aceleran su consecución.
La característica más sobresaliente de las enzimas es su elevada especificidad. Esta es doble y explica que no se formen subproductos: (1) Especificidad de sustrato. El sustrato (S) es la moléculasobre la que el enzima ejerce su acción catalítica. (2) Especificidad de acción. Cada reacción está catalizada por un enzima específico.
La acción enzimática se caracteriza por la formación de un complejo que representa el estado de transición.
E + S ES E + P
La velocidad de reacción está dada por la ecuación:
Donde V0es la velocidad inicial del proceso
V0 = Vmáx [S]
KM + [S]
[S] = concentración de sustrato
KM = constante de Michaelis – Menten
Vmáx = velocidad máxima
Los estudios de inhibición enzimática clásica reversible implican el análisis gráfico de los recíprocos de las velocidades iniciales 1/Vo y de las concentraciones de sustrato 1/ [S].
Resumen
Realizamos esteexperimento con el fin de saber cómo las enzimas actúan sobre un sustrato específico por solicitud de un inhibidor o sin él inhibidor. El inhibidor hace que la reacción sea más lenta.
Los enzimas son piezas esenciales en el funcionamiento de todos los organismos vivos, actuando como catalizadores de las reacciones de síntesis y degradación que tienen lugar en ellos. La utilización de enzimas en losalimentos presenta una serie de ventajas, además de las de índole económica o tecnológica.
Materiales
* Baño termométrico
* tubos de ensayo
* gradilla
* bureta
* gotero
* pipeta
* erlenmeyers
* embudo buchner,
* licuadora
* espectrofotómetro
* papa congelada
Reactivos
Sustancia | Toxicidad |
Pirogalol | La sustancia irrita los ojos, lapiel y el tracto respiratorio. Puede tener efectos sobre el hígado, los riñones y la sangre, dando lugar a una disminución de oxígeno. La sustancia tiene una gran afinidad por el oxígeno de la sangre. |
Fluoruro de sodio 1% | Irritación severa de la boca, de la garganta, del esófago y del estómago. Salivación abundante, Náuseas, vómitos, calambres abdominales y diarrea, Tos y dificultad enrespirar. |
Ácido benzoico 0.02% | Puede causar por inhalación irritación del tracto respiratorio, tos, dolor de garganta, náuseas, vómito. |
Sulfato de amonio | Causa irritación en los ojos, irritación del tracto respiratorio. |
Solución saturada 60-70% | En esta dislocucion hay un equilibrio entre la sustancia dispersa y la dispersante. |
Diseño Experimental
* Es importante que antes deiniciar el procedimiento de extracción de la enzima, todos los materiales estén en frío, incluyendo el NaF, la licuadora y el sistema de filtración previamente lavado con agua fría. También se recomienda tener los tubos de ensayo listos con las soluciones necesarias para medir la actividad.
* Cortamos la papa congelada en trozos de 1 cm por lado. Eliminamos la cáscara y colocamos los...
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas
Escuela de Farmacia
Informe de Bioquímica
Pertenece a:
Eynar Toruño
Profesora:
Dayli Acosta
Segundo año
II Semestre
Año
2011
Experimento 6
Estudio de Inhibición de la Fenoloxidasa de la papa
Objetivos
1. Determinar la actividad enzimática de la fenoloxidasa presente en extractos depapa.
2. Calcular la Km de la enzima de los datos de actividad enzimática, frente a diferentes concentraciones de sustrato.
3. Estudiar el tipo de inhibición que ejerce el ácido benzoico sobre la actividad de la fenoloxidasa de la papa.
Marco Teórico
Las enzimas son catalizadores muy potentes y eficaces, químicamente son proteínas. Como catalizadores, las enzimas actúan en pequeñacantidad y se recuperan indefinidamente. No llevan a cabo reacciones que sean energéticamente desfavorables, no modifican el sentido de los equilibrios químicos, sino que aceleran su consecución.
La característica más sobresaliente de las enzimas es su elevada especificidad. Esta es doble y explica que no se formen subproductos: (1) Especificidad de sustrato. El sustrato (S) es la moléculasobre la que el enzima ejerce su acción catalítica. (2) Especificidad de acción. Cada reacción está catalizada por un enzima específico.
La acción enzimática se caracteriza por la formación de un complejo que representa el estado de transición.
E + S ES E + P
La velocidad de reacción está dada por la ecuación:
Donde V0es la velocidad inicial del proceso
V0 = Vmáx [S]
KM + [S]
[S] = concentración de sustrato
KM = constante de Michaelis – Menten
Vmáx = velocidad máxima
Los estudios de inhibición enzimática clásica reversible implican el análisis gráfico de los recíprocos de las velocidades iniciales 1/Vo y de las concentraciones de sustrato 1/ [S].
Resumen
Realizamos esteexperimento con el fin de saber cómo las enzimas actúan sobre un sustrato específico por solicitud de un inhibidor o sin él inhibidor. El inhibidor hace que la reacción sea más lenta.
Los enzimas son piezas esenciales en el funcionamiento de todos los organismos vivos, actuando como catalizadores de las reacciones de síntesis y degradación que tienen lugar en ellos. La utilización de enzimas en losalimentos presenta una serie de ventajas, además de las de índole económica o tecnológica.
Materiales
* Baño termométrico
* tubos de ensayo
* gradilla
* bureta
* gotero
* pipeta
* erlenmeyers
* embudo buchner,
* licuadora
* espectrofotómetro
* papa congelada
Reactivos
Sustancia | Toxicidad |
Pirogalol | La sustancia irrita los ojos, lapiel y el tracto respiratorio. Puede tener efectos sobre el hígado, los riñones y la sangre, dando lugar a una disminución de oxígeno. La sustancia tiene una gran afinidad por el oxígeno de la sangre. |
Fluoruro de sodio 1% | Irritación severa de la boca, de la garganta, del esófago y del estómago. Salivación abundante, Náuseas, vómitos, calambres abdominales y diarrea, Tos y dificultad enrespirar. |
Ácido benzoico 0.02% | Puede causar por inhalación irritación del tracto respiratorio, tos, dolor de garganta, náuseas, vómito. |
Sulfato de amonio | Causa irritación en los ojos, irritación del tracto respiratorio. |
Solución saturada 60-70% | En esta dislocucion hay un equilibrio entre la sustancia dispersa y la dispersante. |
Diseño Experimental
* Es importante que antes deiniciar el procedimiento de extracción de la enzima, todos los materiales estén en frío, incluyendo el NaF, la licuadora y el sistema de filtración previamente lavado con agua fría. También se recomienda tener los tubos de ensayo listos con las soluciones necesarias para medir la actividad.
* Cortamos la papa congelada en trozos de 1 cm por lado. Eliminamos la cáscara y colocamos los...
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