Microbiología






























































PRÁCTICA 1.PREPARACIÓN DE MEDIOS PARA EL ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS


· Objetivo
En esta práctica llevamos a cabo la preparación de medios de cultivos generales con volúmenes distintos, a cada grupo se le asigno un volumen, a nosotros, el grupo 3, nos toco125ml, pero lo realizamos de la mitad de la cantidad, 62.5ml, ya que así será mucho más preciso.


· Procedimiento
Lo primero que realizamos fue pesar la cantidad necesaria del medio, que son 1,09375~1,09g (obtenido a través del calculo realizado posteriormente), lo depositamos en un matraz, ajustamos con agua destilada y disolvemos completamente el medio. A continuación ajustamos su pH, aunqueeste medio es comercial y no van a existir cambios, pero es bueno realizarlo porque cuando se añaden azúcares o se emplean para la fabricación de medicamentos el pH cambia, el pH obtenido en nuestro caso fue 7,4.
Después lo llevamos a ebullición en el microondas durante un 1minuto y 2segundos, lo depositamos en el recipiente y lo introducimos a la olla a presión a 121ºC durante 15 minutos yplaqueamos.
Una vez secadas las placas, las marcamos y las mantenemos a 4ºC para evitar que se sequen.


·Calculo de la cantidad de medio necesario para 62,5ml=0,06251L


17,5g ................ 1L
x ..................... 0,0625l L

x = 1,09375g~1,09g









PRÁCTICA 2. PREPARACIÓN DE MUESTRAS, HOMOGENEIZADOS YDILUCIONES


· Objetivo
En esta práctica a diferencia de la anterior, ya poseíamos los medios de cultivo hechos, por lo que realizamos un recuento y aislamiento de microorganismos a partir de una serie de alimentos: leche, paleta de pavo y carne picada en mi caso.
Este análisis le llevamos a cabo en tres etapas diferentes:


· Procedimiento

1. HOMOGENEIZACIÓN

Esta etapa la realizamospara que todos los microorganismos se distribuyan por igual en todo el alimento, en el caso de líquidos, como la leche, es suficiente con agitar mientras que en el caso de sólidos, como la carne picada y la paleta de pavo, es necesario triturarlos.
Para triturar pesamos 10g de carne picada y lo mezclamos con 90ml de agua de peptona (diluyente estéril) en la bolsa estéril y a continuación lointroducimos en la paleta de 1-2 minutos


2. DISOLUCIONES

Realizamos disoluciones decimales para reducir la concentración de microorganismos y así
poderlos contar mejor. Tomamos 1ml de la bolsa estéril con ayuda de una pipeta automática a un tubo de ensayo con 9ml de diluyente y agitamos, este proceso lo realizamos hasta llegar a una disolución de 10-6cogiendo siempre 1ml de la disolución anterior.
Obteniendo así, el primer tubo con la primera disolución procedente de la bolsa, la segunda disolución en el segundo tubo, la tercera en el tercer tubo y así hasta llegar a seis disoluciones en seis tubos diferentes.


3. SIEMBRAS

Llevamos a cabo tres tipos diferentes de siembra, todas ellas de manera duplicada:

Gotas ensuperficie: dividimos las las placas en tres trozos, y sembramos en cada trozo depositando sobre el agar dos puntos de 0,02ml= 20ml de distintas disoluciones (10-2, 10-4, 10-6)
Profundidad: empleamos placas vacías, sin medio de cultivo, y depositamos 1ml= 1000ml de los tubos en la base y añadimos 20ml de medio de cultivo líquido, para que se distribuya por toda la placa giramos unas cinco veces las placasen sentido a las agujas del reloj, otras cinco en sentido opuesto y por ultimo otras cinco simulando una cruz.
Superficie: tomamos 0,1ml= 100ml de los tubos y los depositamos sobre el agar y a continuación lo estendemos con ayuda del asa de siembra esterilizada.

Todas estas siembras las realizamos al lado del mechero para evitar contaminaciones, después incubamos las placas con posición...