microbiologia

Introducción
En el campo de la microbiología, el término siembra se refiere a de depositar un microorganismo que se desea estudiar en un medio de cultivo previamente esterilizado que favorezca su desarrollo, empleando siempre instrumentos asépticos y tomando en cuenta todas las medidas de seguridad necesarias.

En su libro, Madigan (2004), explica los siguientes tipos de siembra:

Métodopor extensión.- En este método de siembra, se vierte en la placa un volumen determinado de cultivo diluido, el cual no debe ser superior a 0,1ml. Una vez en la placa, se lo extiende sobre la superficie de la misma con medio sólido utilizando un asa de inoculación. Es de suma importancia esterilizar el asa antes de cualquier operación, de no ser así la muestra puede contaminarse alterando losresultados finales. Posteriormente se incuba la placa hasta que se observe la aparición de colonias, lo que hace posible su recuento. La superficie del medio debe estar seca para que el líquido de la muestra pueda absorberse. Generalmente no se utilizan volúmenes mayores a 0,1ml, ya que el exceso de líquido puede no absorberse originando problemas en el recuento, favoreciendo la extensión y mezcla delas colonias. Este tipo de siembra es solo superficial, es decir, las colonias crecerán únicamente en la superficie de la placa.

Método de vertido en placa.- En este método se prepara un volumen conocido de cultivo, generalmente entre 0,1 y 1,0ml en una caja Petri estéril, sobre la cual se añade el medio con agar fundido y se mezcla simplemente con movimientos circulares de la placa de manera quela solución se extienda en toda la superficie. Esto debe realizarse antes de que el medio solidifique. Debido a que el agar fundido puede presentar una temperatura relativamente elevada, los organismos que se cuentan deben ser capaces de soportarla, que normalmente oscila entre los 40 y 45C°.



Además de estas dos técnicas existe la siguiente mencionada en el libro de Vullo (2000):Método de siembra en estría.- Con un asa de siembra se toma una muestra de la población mixta y a continuación se hacen estrías sobre la superficie de un medio sólido preparado en una placa Petri (a las placas Petri también se les denomina simplemente placas). Conforme se van haciendo estrías en zigzag con el asa, cada vez se van depositando en la superficie del medio menos microorganismos. Acontinuación, se flamea el asa, se toca en la región donde se han realizado las últimas estrías y se continúa la siembra con la misma técnica, en la superficie de medio sin sembrar aún. Repitiendo este proceso varias veces se logra separar células individuales.

Objetivos
- En las muestras con leche, señalar que medios de cultivo presentaron crecimiento de colonias, para poder distinguir quemicroorganismos se encuentran en este líquido.
- Comparar los resultados obtenidos entre las siembras con leche y las siembras con E. Coli para constatar, de este modo, la calidad higiénica de la leche.

Materiales
Leche.
Agar Plate Count.
Agar Potato Dextrosa.
Caldo Verde Bilis Brillante.
Caldo EC.
Cultivos puros de bacteria (Scherichia Coli).
Estufa.
Alcohol.
Pipetas de 5ml y de 1ml.
Asade inoculación
Espátula Drigalski.
Cajas Petri.
Mechero Bunsen.
Parafilm.
Incubadora.

Procedimiento
*Debido a que los medios de cultivo agar Plate Count y agar Potato Dextrosa se encontraban en fase sólida, se los calentó en la estufa para volverlos a su fase líquida.
1. Siembra en Profundidad
Se colocaron 0,1ml de la muestra de leche en la caja Petri estéril, seguidos de 10 a 15ml deagar Plate Count enfriado a 45°C aproximadamente. Posteriormente se procedió a homogenizar la muestra realizando movimientos circulares en forma de ocho, teniendo especial cuidado en no dejar que el cultivo toque las paredes de la caja Petri, o forme burbujas. Finalmente, se dejó enfriar y se incubó las muestras a 37°C por 24 horas.

2. Siembra en Superficie
Se colocaron 0,1ml de la muestra...