Microcultivo

MÉTODO DE MICROCULTIVO
El preparado de microcultivo (también conocido como cultivo en portaobjeto) se realiza de la siguiente manera:
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En lasuperficie de una caja de petris se coloca un pedazo de papel de filtro o un trozo de algodoón y dos varillas de vidrio, cortadas de un tamaño adecuado. Secoloca un portaobjeto sobre las varillas y se esteriliza. Se corta un pequeño bloque de agar papas o similar previamente vertido en una caja de Petris hastauna profundidad de 4 mm. Esto puede hacerse usando una hoja de bisturí estéril o un tubo de ensayo recto estéril sin bordes.Con el mismo bisturí estéril secoloca el bloque de agar sobre la superficie del portaobjeto.Con un ansa aguja estéril se remueven porciones pequeñas de colonia de hongos que se deseaestudiar y se inocula en los cuatros cuadrantes del bloque de agar.Luego de la inoculación, se coloca un cubreobjeto estéril sobre la superficie del agar.Secontrola que el papel o el trozo de algodón esten húmedo y se incuba.La colonia crecerá por debajo de la superficie del cubreobjeto. Se examina el montajeperiódicamente a simple vista para determinar si la colonia ha madurado y esta lista para su observación microscópica.Cuando es evidente el crecimiento, seretira cuidadosamente el cubreobjeto con pinzas estériles y se coloca en un portaobjeto que contiene una gota de lactofenol azul de algodón. Si se desea unmontaje permanente, se limpia la superficie del portaobjeto inmediatamente adyacente al borde del cubreobjeto y se aplica esmalte para uñas color claro. |