Microscopía

Álvarez Fernández G, Bustos Jaimes I, Castañeda Patlán C, Guevara Fonseca J, Romero Álvarez I, Vázquez Meza H. (eds). Mensaje Bioquímico, Vol. XXXIV, 2010, 157164. Depto de Bioquímica, Fac de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México. Cd Universitaria, México, DF, MÉXICO. (http://bq.unam.mx/mensajebioquimico) (ISSN-0188-137X)

ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN GENÉTICA IN SITU CON EL MICROSCOPIODE FUERZA ATÓMICA
Luis Felipe Jiménez-García1, Alma Zamora-Cura1,2, Nadia Gutiérrez-Quintanar3, Ernesto Villalobos-Nájera4, María de Lourdes Segura-Valdez1
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Laboratorio de Nanobiología Celular, Departamento de Biología, Facultad de Ciencias, UNAM. Circuito Exterior, Ciudad Universitaria, Coyoacán 04510, México D.F., México 2 Programa de Doctorado en Ciencias Biomédicas-UNAM 3 UniversidadAutónoma del Estado de México (UAEMex) 4 Universidad Autónoma de la Ciudad de México (UACM) luisfelipe_jimenez@ciencias.unam.mx

Resumen La expresión genética se ha analizado principalmente por medio de técnicas bioquímicas y moleculares in vitro. Combinadas con técnicas de microscopía producen una visión de los procesos in situ, es decir, en compartimientos celulares. Aunque hay gran cantidad detrabajos con los microscopios de luz y electrónico, se conoce menos sobre la estructura celular con el microscopio de fuerza atómica. En este trabajo se revisa la posibilidad de estudiar la estructura celular con este instrumento, lo que puede favorecer el análisis de la expresión genética in situ. Palabras clave: AFM, expresión genética, microscopio de fuerza atómica, núcleo.

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MENSAJEBIOQUÍMICO, Vol. XXXIV (2010) Abstract Gene expression has been mainly analyzed by in vitro biochemical and molecular approaches. Combined with microscopy techniques, these methods produce an in situ view of the processes, it is to say within the cell compartments. Although there are many efforts made with the light and electron microscopes, there are few data on cell structure by atomic forcemicroscopy. Here we review the possibility to study cell structure by atomic force microscopy, an aspect that would help in analyzing in situ gene expression.

Keywords: AFM, atomic force microscope, gene expression, nucleus.

Introducción El microscopio de fuerza atómica fue inventado en 1982 [1]. Pertenece a una familia de microscopios cuyo origen es el microscopio de efecto túnel cuatro añosantes [2]. Gerd Binnig y Heinrich Rohrer recibieron el premio Nobel de Física en 1986, solamente cuatro años después de su invento, compartiéndolo con Ernst Ruska, por inventar el microscopio electrónico con Max Knoll en los inicios de los años 1930. Principios de Microscopía de Fuerza Atómica El microscopio de fuerza atómica es el más versátil de la familia de microscopios conocida comomicroscopios de barrido por sonda (scanning probe microscopes, SPMs) [3]. El poder de generar imágenes de sistemas biológicos en tiempo real, bajo condiciones naturales o fisiológicas con una resolución molecular, e incluso submolecular, es de interés para las ciencias biológicas [3]. El microscopio de fuerza atómica cumple con estas expectativas y es más que una herramienta que genera imágenestridimensionales de la ultraestructura de una superficie con resolución molecular. El microscopio puede medir las propiedades físicas de la muestra, tales como interacciones moleculares, hidrofobicidad de la superficie, cargas en la superficie y propiedades mecánicas. Estas características permiten una nueva forma de observar la relación entre la estructura y la función en diferentes sistemas biológicos [4].El microscopio de fuerza atómica es similar en su concepción al microscopio de barrido de efecto túnel (scanning tunnelling microscope, STM) [3] (Figura 1).

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Jiménez García y cols.

Figura 1. Esquema que representa el principio del microscopio de fuerza atómica (ver texto).

Las imágenes de microscopio de fuerza atómica no se obtienen por medio de la incidencia de luz como en los...