microscopia

UNIVERSIDAD DEL CAUCA
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES, EXACTAS Y DE LA EDUCACIÓN
DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA








KATHERIN MORCILLO ORDOÑES
JUAN PABLO FERNANDEZ M












CLARA INEZ GIRALDO
PROFESORA


POPAYAN 2013
METODOLOGIA


Esta practica se desarrolló bajo los parámetros de la guía de trabajo titulada “Manual de Prácticas para Biología Celular”, dondese realizaron los diferentes pasos que permitieron conocer mas acerca de los tipos de microscopios y sus componentes.
De esta manera se aprendió, primeramente cómo manejar de forma adecuada el microscopio, después la calibración para tener en cuenta las dimensiones del objeto a observar. Luego con la ayuda de un hemocitómetro, vimos la estimación de la concentración de células pues es suprincipal aplicación en la estimación de población celular.
Lo anterior con la finalidad de describir la práctica realizada mediante la extracción de resultados por medio de la implementación de la teoría contenida en la guía antes mencionada y la posterior discusión de resultados.

PRACTICA 1

CONCEPTOS BÁSICOS DE MICROSCOPIA OPTICA


Tabla N#1 de comparación de microscopios:

ComparaciónMicroscopio Compuesto
Microscopio Electrónico de transmisión
Resolución
0.2 micras
0.01 micras
Lentes
4x, 10x,40x,100x

Fuente de luz
Bombilla, normal blanca o amarilla
Fuente de electrones
Muestras
Células: tejidos vivos y muertos
Muestras muertas
Colorantes
Diferentes colorantes
Se tiñen muestras con sales de metales como por ejemplo: citrato de plomo , tetra oxido de osmioGrosor de muestra
Micrótomo, grosor de la muestra 1-10 corte de tejidos
Ultra micrótomo:
50-10 micras

Luz
La luz atraviesa la muestra
Los electrones atraviesan la muestra



Calibración del microscopio.
Para realizar las mediciones en los campos presentes del microscópico es preciso disponer de una escala adecuada en el ocular del microscopio. Así, antes de utilizar dicha escala se tendráque calibrar. Los micrómetros oculares son discos planos de vidrio que llevan grabada una escala lineal dividida en 50 ó 100 pequeñas divisiones. Estas divisiones tienen diferentes valores de medición con arreglo al poder de resolución del objetivo utilizado. El valor de medición se calcula utilizando un micrómetro de platina provisto de una escala calibrada en divisiones de 0.1 mm ysubdivisiones de 0.01 mm. Para calibrar el micrómetro ocular se procede del modo siguiente:

1. Retirar el ocular (de 10X o de otra graduación) del microscopio y desenroscar la lente superior o inferior, según el modelo de que se trate. Colocar la escala sobre el diafragma situado en el lado grabado contra la superficie inferior del retículo. Volver a enroscar la lente y reinsertar el ocular en elmicroscopio.
2. Colocar el micrómetro de platina sobre la platina del microscopio y enfocar el objetivo de menor aumento en algún segmento de la escala con el ocular de 10X.
3. Ajustar el micrómetro de platina desplazando ésta de manera que la línea cero del micrómetro ocular quede exactamente sobre la línea cero del micrómetro de la platina.
4. Sin mover el micrómetro de la platina, encontrará otropunto en el extremo derecho en el que coincidan con exactitud otras dos líneas. Este segundo par de líneas superpuestas debe estar lo más alejado posible de la línea cero. La distancia dependerá del objetivo utilizado. Con los mayores aumentos, las líneas pueden aparecer tan gruesas que sea necesario buscar la superposición del borde derecho o izquierdo de cada una de ellas.
5. Contar en elmicrómetro ocular el número de divisiones entre la línea cero y el punto de donde se superpone el segundo par de líneas. En la figura adjunta, por ejemplo, este número, indicado por la línea de puntos, equivale a 33 unidades del ocular.
6. Contar luego el número de líneas de divisiones de 0.1 mm entre la línea cero y el segundo par de líneas superpuestas en el micrómetro de la platina; en la figura,...