Microscopia

Microscopía (o también sin tilde «microscopia»)1 es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo normal.
Si bien el microscopio es el elemento central de la microscopía, el uso del mismo requiere para producir las imágenes adecuadas, de todo un conjunto de métodos y técnicas afines peroextrínsecas al aparato. Algunas de ellas son, técnicas de preparación y manejo de los objetos de estudio, técnicas de salida, procesamiento, interpretación y registro de imágenes, etc.
Exceptuando técnicas especiales como las utilizadas enmicroscopio de fuerza atómica, microscopio de iones en campo ymicroscopio de efecto túnel, la microscopía generalmente implica la difracción, reflexión o refracción dealgún tipo de radiación incidente en el sujeto de estudio.
Escala de reproducción: es la relación lineal que existe entre el tamaño del objeto y su imagen. Por ejemplo, 4:1, 10:1, 40:1.
Aumento: es la proporción entre el tamaño de la imagen observada al microscopio y el tamaño real del objeto. Aumento total se calcula multiplicando aumento de ocular por el del objetivo.
Distancia frontal:distancia entre el objeto observado y la lente del objetivo utilizado, cuando se encuentra bien enfocada la muestra. Es inversamente proporcional al aumento.
Profundidad de campo o de foco, o poder de penetración: espesor del preparado que se observa con nitidez, o profundidad de planos que están en foco en un momento dado. Con aumentos más grandes se observa sólo pequeños espesores con nitidez,mientras que por arriba y debajo de estos la imagen se desvanece; por lo tanto también es inversa al aumento.
Campo observado: porción del preparado incluida en la imagen. Su tamaño también es inverso al aumento utilizado y va determinado por el área de campo visual de cada objetivo.
Poder de resolución (PR): capacidad de los lentes de mostrar separados con nitidez dos puntos. Si el PR es mayorquiere decir que la distancia que separa estos dos puntos es menor. Por lo tanto da una imagen más detallada.
Límite de resolución: distancia mínima que debe existir para que dos puntos del objeto se visualicen por separado.
Apertura numérica: medida de la capacidad del microscopio de agrupar las refracciones de la luz producidas por los finos detalles del objeto. Es propia de cada objetivo.

Unmicroscopio simple (de un lente o varios lentes), es un instrumento que amplifica una imagen y permite la observación de mayores detalles de los posibles a simple vista. El microscopio más simple es una lente de aumento o un par de anteojos.
El poder de resolución del ojo humano es de 0,2 mm es decir que para ver dos objetos separados estos deben estar como mínimo a esa distancia.
El microscopioaumenta la imagen hasta el nivel de la retina, para captar la información.
La resolución depende de la longitud de onda de la fuente luminosa, el espesor del espécimen, la calidad de la fijación y la
intensidad de la coloración.
Teóricamente la máxima resolución que se puede alcanzar es de 0,2 um dada por una luz con longitud de onda de 540 nm, la cual pasa por un filtro verde (muy sensible porel ojo humano) y con objetos condensadores adecuados. El ocular aumenta la imagen producida por el objetivo, pero no puede aumentar la resolución.

Existen distintos microscopios ópticos generales y de investigación que se diferencian en factores tales como la longitud de onda de la iluminación del espécimen, la alteración física de la luz que incide en la muestra y procesos analíticos que seaplican a la imagen final.

Microscopía óptica ( longitud de onda: 400-700nm) Espectro de luz visible
+ Imagen 2D (Microscopios 1,2,3)
1- Microscopio de fondo claro
Se ve todo claro menos la preparación
Usa como fuente de luz directa una bombilla o la luz solar
La muestra a observar debe ser fina para que pueda ser atravesada por la luz
Los microorganismos se suelen teñir (por...