Microscopia


MICROSCOPIA II

RESUMEN

El campo visual, el poder de resolución y el aumento total son de suma importancia al observar a través de un microscopio por esta razón es importante conocerlos detalladamente, en esta práctica de laboratorio realizamos los cálculos correspondientes para determinar dichos conceptos y aplicarlos a las células de elodea y cebolla.

INTRODUCCIÓN

Para el desarrollo dellaboratorio Microscopia II es importante conocer los conceptos de campo visual, poder de aumento y poder de resolución.
Campo visual del microscopio:
El campo visual es aquella área circular visible al observador cuando este enfoca al microscopio, Esta área varía de acuerdo a la clase de objetivo y de ocular utilizados. Para medir el campo de visión de un microscopio, se debe usar una unidadllamada micra. Una micra equivale a 0,0001mm. El diámetro de este campo es su medida. (Abramowitz, 2007)
Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del microscopio. La forma del campo está determinada por el diafragma fijo del ocular, que generalmente es de forma circular. (Armas, s.f)

Aumento y resolución
El aumento total deun microscopio compuesto es el producto del aumento debido a la lente del objetivo por el aumento de la lente ocular. Aumentos de 1500 veces están cércanos al límite superior de lo que se puede conseguir en un microscopio óptico compuesto. Este límite viene impuesto por la propiedad de la resolución de las lentes. El poder de resolución es una función de la longitud de onda de luz utilizada y deuna característica propia de las lentes denominada apertura numérica (una medida de la capacidad de captación de la luz por el lente). En general, hay una correlación entre la capacidad de aumento de una lente y su apertura numérica: las lentes de mayor aumento poseen generalmente mayores aperturas numéricas (la apertura numérica de una lente se suele marcar en ella al lado de su aumento). Eldiámetro del objeto más pequeño que se puede resolver es igual a 0,5 λ / apertura numérica, donde λ representa la longitud de onda de luz usada. Por esta razón, la resolución aumenta cuando se usa luz azul para iluminar la muestra y la lente objetivo tiene una apertura numérica muy alta. Como se ha indicado la máxima resolución alcanzable en un microscopio óptico compuesto es de unos 0,2 µm. estosignifica que dos objetos que estén más próximos que esa distancia no podrán verse como entidades distintas y separadas. La mayoría de los microscopios utilizados en microbiología poseen oculares que aumentan de 10 a 15 veces y objetivos que aumentan de 10 a 100 veces. Con aumentos de 1000 veces, los objetos de 0,2 µm pueden apreciarse con dificultad. Con los objetivos de 100 aumentos, y con otrosobjetivos de apertura numérica muy elevada, se emplea aceite de inmersión para que no exista aire entre la preparación y el objetivo. Las lentes con las que se usa aceite de inmersión se denominan objetivos de inmersión. Este tipo de aceite se utiliza porque aumenta la capacidad de captación de luz por la lente, lo que facilita que los rayos que emergen de la muestra con gran ángulo (y que se perderíanpor no llegar a la lente objetivo de otro modo) sean captados y percibidos. (Madigan, Martinko, & Parker, 2003).
Unidades utilizadas en microscopia:
Una unidad de medida es una cantidad estandarizada de una determinada magnitud física. Para determinarla se emplea el Sistema Internacional de Unidades (SI) también conocido como sistema métrico, que es el más ampliamente usado. (Armas, s.f)
Para lamicroscopia las unidades más utilizadas son:
• El micrómetro (µm) es la unidad de longitud equivalente a una millonésima parte de un metro, abreviado µ (plural latino: micra). También conocido como micrón.
• El nanómetro (nm) es la unidad de longitud que equivale a una milmillonésima parte de un metro. Utilizada además para medir las longitudes de onda de las radiaciones electromagnéticas, la...