Introducción

La mitosis es la división nuclear asociada a la división de las células somáticas. Las dos partes fundamentales del ciclo son la interfase (que abarca G1, S y G2) y la mitosis. Las fases de la mitosis son: Profase, Metafase, Anafase, Telofase, para luego concluir en la Citocinesis donde se produce la separación final de las dos células hijas.

Objetivos

Reconocer microscópicamente las distintas fases de la división mitótica y sus características sobresalientes, como también calcular el índice mitótico y los índices de fases para determinar la velocidad relativa de desarrollo de cada etapa en el ciclo celular de Allium cepa.Materiales

Raicillas jóvenes de Allium cepa, herramientas de laboratorio e instrumental óptico adecuado.

Técnica operatoria

- Poner a enraizar bulbos de cebolla, y cortar las raíces cuando alcanzan 0,5 – 1 cm.
- Fijar las raicillas en una mezcal de alcohol etílico absoluto y ácido acético glacial (3:1), para detener los procesos celulares y conservar el material.
- Para descomponer el cemento péctico de la pared celular, colocar las raicillas en un vidrio de reloj y realizar una hidrólisis con ácido clorhídrico (HCl 1N) a temperatura ambiente durante 10-30 minutos.
- Colocar las raicillas sobre portaobjetos. Distinguir y retirar la cofia y, luego,diseccionar los meristemas apicales que se distinguen mas blanquecinos. Conservar una porción meristemática de 0.5-1 mm.
- Agregar una pequeña gota de de colorante Orceína Acética 2%, disgregar los tejidos apicales con una barra metálica de extremo plano, y colocar un cubreobjeto.
- Para aclarar el citoplasma y aumentar el contraste de los cromosomas se puede flamear el preparado con mechero. La temperatura debe controlarse.
- Para eliminar los excesos de colorante y obtener una preparación bidimensional, realizar un squash (aplastado). Para ello se coloca el preparado entre papeles absorbentes, sosteniendo con los dedos de una mano y presionando [continua]

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