morfologia y tincion

• Introducción

Trabajo práctico Nº 6

• Ejercicio teórico

MORFOLOGÍA Y TINCIÓN DE LOS
MICROORGANISMOS

• Objetivo
• Procedimiento
• Resultados
• Actividades adicionales
• Bibliografía

INTRODUCCIÓN
Una de las características más importante de las bacterias es su morfología, definida por el tamaño, la
forma, el arreglo y la estructura. Existen bacterias en
forma redondeadadenominadas cocos, en forma
cilíndrica, denominadas bacilos y una tercera morfología como son las que tienen forma de espirales,
denominadas espirilos. A su vez cada categoría puede subclasificarse con base a diferentes arreglos.
Estas características pueden determinarse examinando muestras al microscopio. Las células no teñidas son prácticamente transparentes, pero pueden
observarse almicroscopio de luz haciendo preparaciones entre lámina y laminilla o con microscopios
especiales como por ejemplo: de contraste de fases o
de campo oscuro.
Cuando se dispone de un microscopio de luz, se
pueden teñir las bacterias para facilitar su visualización. Si se tiñe una muestra del cultivo extendida y
fijada en una lámina portaobjeto con un colorante dado, las células adquirirán el color delcolorante añadido y podrá observarse la forma, tamaño y el arreglo
de las mismas. Este tipo de coloración se conoce con
el nombre de coloración simple.

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA – MORFOLOGÍA Y TINCIÓN DE LOS MICROORGANISMOS
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Para obtener mayor información sobre la morfología y composiciónquímica de las
bacterias, debe recurrirse a tinciones diferenciales que involucran el uso de varios reactivos y éstas pueden diferenciarse con base al color que retienen. Ej. Tinción de Gram y Tinción de Ziehl Neelsen.
PREPARACIÓN ENTRE LÁMINA Y LAMINILLA
Este tipo de preparación permite observar vivos a los microorganismos y resulta
muy útil cuando se quiere determinar su motilidad. Estaspreparaciones son muy
fáciles de realizar, pues sólo se coloca sobre la lámina portaobjeto la suspensión
de microorganismos a observar y luego ésta se cubre con una laminilla. Entre los
principales inconvenientes que tiene esta preparación, es que al no estar los microorganismos teñidos, se dificulta su observación al microscopio y se puede confundir el movimiento microbiano con las corrientesinternas que se producen a
causa de la evaporación del medio a través del borde de la laminilla.
COLORACION SIMPLE
Las tinciones se basan en la utilización de colorantes que pueden clasificarse como naturales o sintéticos. Los naturales se utilizan principalmente con fines histológicos. La mayor parte de los colorantes que se utilizan para teñir bacterias son
sintéticos, muchos de ellos son lasanilinas y los derivados del benceno.
Se habla de coloración simple cuando una muestra extendida se tiñe con un solo
colorante. Si la preparación se tiñe con safranina, las bacterias adquirirían un color
rojo, si se utiliza azul de metileno, se teñirán de azul, si por el contrario se tiñen
con cristal violeta, las bacterias aparecerán teñidas de color violeta, es decir adquirirán el color delúnico colorante que se utilizó. Este procedimiento permite distinguir la morfología y estructuras internas de la célula bacteriana, como por ejemplo,
la presencia de endospora bacteriana. Existen coloraciones especiales que permiten poner de manifiesto estructuras bacterianas como por ejemplo: flagelo, cápsula, endosporas, etc.
TINCION DE GRAM
En 1884, un bacteriólogo danés, Christian Gram,desarrolló una técnica de tinción
que permite separar a las bacterias en dos grandes grupos: gram positivas y gram
negativas, basados en si retienen o no, el colorante primario (cristal violeta) luego
del proceso de decoloración. Los organismos que retienen el cristal violeta luego
de la adición del agente decolorante, el alcohol, aparecen como azul oscuro o violeta, y se designan como gram...