Tincion

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Naranja de acridina

Estructura química del naranja de acridina.
El naranja de acridina (o N,N,N',N'-tetrametilacridina según IUPAC) esun colorante catiónico selectivo para los ácidos nucleicos y útil para realizar determinaciones sobre elciclo celular. Interacciona con el ADN y el ARN por intercalación dentro de la molécula o por atracciónelectrostática, respectivamente.
Cuando está asociado al ADN, el naranja de acridina es espectralmente similar a la fluoresceína, presentado un máximo de excitación a 502 nm y una emisión a 525 nm (enel verde). Cuando está asociado al ARN, la excitación máxima deriva a 460 nm (en el azul) y la emisión máxima a 650 nm (en el rojo). Por lo tanto, este colorante tiñe de verde a las células en fase dedivisión activa (mucho ADN), y de naranja a las que están en reposo multiplicativo (mucho ARN y proteínas). El colorante se utiliza frecuentemente en microscopía de epifluorescencia. Se lo prepara apartir del aceite de creosota y del alquitrán de hulla. Se lo utiliza conjuntamente con el bromuro de etidio para diferenciar entre células vivas y apoptóticas.1 2 El naranja de acridina es ademásun mutágeno que tiende a producir mutaciones de desplazamiento del marco de lectura.3
TINCIÓN CON NARANJA DE
ACRIDINA
• Transferir una gota del cultivo a un portaobjetos limpio y desengrasado, dejarsecar al aire.
• Fijar con etanol al 100%, cubriendo el frotis durante 5 min.
• Eliminar el etanol y colocar 100 L de naranja de acridina durante 3 min
.TINCIÓN CON NARANJA DE ACRIDINA
•Eliminar el exceso del colorante con etanol al 70%.
• Observar en un microscopio de epifluorescencia con un filtro azul, emisión a 490 nm.

La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnicade tinción diferencial rápida y económica, para la identificación de microorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis.

TINCIÓN DIFERENCIAL
TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN (AAR)
• Se utiliza para...