Mutagenesis Por Restriccion

Programa académico de Biotecnología.

Materia: Ing. genética
Impartida por: Dr. Jorge Ariel Torres

Reporte de práctica
Mutagénesis por restricción.

Yair Adán Del Ángel AcostaMatricula: 1286377

Escobedo, Nuevo León. A 10 de noviembre del 2012.
Introducción:
La mutagénesis por restricción es una estrategia usada para obtener mutantes genéticas do ciertos organismos mediantela digestión enzimática del ADN con la ayuda de algunas enzimas de restricción. Las enzimas de restricción se denominan según el organismo en el que se descubrieron, utilizando un sistemaalfanumérico. La enzima EcoRI proviene de Escherichia coli; HindIII se descubrió en Hemophilus influenzae.
Hay dos tipos de enzimas de restricción:
• Las enzimas de Tipo I cortan las dos cadenas del DNA enuna posición aleatoria a cierta distancia del sitio de restricción. No se utilizan normalmente en la investigación de DNA recombinante ya que el sitio de corte no es preciso.
• Las enzimas de Tipo IIreconocen una secuencia específica y cortan las dos cadenas de la molécula de DNA con absoluta precisión dentro de la secuencia reconocida.
Se usan ampliamente en investigación de DNA recombinantepuesto que cortan en sitios específicos. Las secuencias reconocidas por las enzimas de Tipo II son simétricas (“palindrómicas”), es decir, la secuencia de una de las cadenas leída en dirección 5' Ö 3'es la misma que la secuencia de la cadena complementaria leída también en dirección 5' Ö 3'. La enzima EcoRI corta las cadenas de manera escalonada dentro del sitio de reconocimiento, dejando extremosde cadena sencilla. Estas colas, que tienen secuencias nucleotídicas idénticas, son “pegajosas” (cohesivas), ya que pueden unirse a colas complementarias de otros fragmentos de DNA mediante puentesde hidrógeno. Si moléculas de DNA de diferente origen comparten los mismos sitios de reconocimiento palindrómicos, ambas tendrán colas complementarias de cadena sencilla cuando se traten con una...