Nada

ELECTROFORESIS


ALUMNOS:

Bregante Cecilia
Muscio María Sol
Pacheco Shirley
Parente Antonella
Schonfeld Sebastián
Veliz Hugo

Objetivos:

* Calcular la movilidad electroforética (µ) de los aminoácidos lisina y ácido aspártico.
* Analizar las variables experimentales que afectan la distancia recorrida por una moléculacargada cuando la misma es sometida a un campo eléctrico.

Fundamentos:

La electroforesis es una técnica separativa basada en el fenómeno de migración diferencial dado en partículas cargadas eléctricamente al estar bajo la influencia de un campo eléctrico.

Una carga eléctrica una vez que se encuentra en un campo eléctrico sufre una fuerza de atracción o repulsión. Dicha carga migrará haciael polo opuesto, es decir si fuese una carga positivo iría hacia el polo negativo, el cátodo. Esta fuerza se ve reflejada en la Ley de Coulomb:


Cuando se encuentre la partícula en un campo eléctrico homogéneo el modulo de la fuerza dependerá de la carga de la partícula y de la intensidad de dicho campo:Al principio esta fuerza hace que la partícula obtenga una aceleración inicial y como resultado esta comienza a moverse. Esta relación entre aceleración y fuerza, la encontramos en la segunda ley de Newton:

En cambio, cuando la partícula se encuentre sumergida en un fluido, es decir un buffer en esta técnica, aparecerásobre ella la fuerza de rozamiento dado que el fluido se esta oponiendo a su movimiento. Esta fuerza de rozamiento tendrá igual dirección que la fuerza eléctrica pero sentido opuesto y será proporcional a la velocidad de la partícula.



K: coeficiente de fricción, incluye variables como laviscosidad del medio, tamaño y forma de la partícula.

Si se considera que dicha partícula posee una forma esférica moviéndose en condiciones en las cuales se cumple la ley de Stokes la expresión de la fuerza de rozamiento seria la siguiente:


Cuando la partícula comienza a adquirir movimiento estarán en juego la fuerza eléctrica o deatracción y la fuerza de rozamiento. Por lo tanto la fuerza resultante será la diferencia entre ellas siendo esta fuerza resultante la que determinara la migración de la partícula en el medio de corrida.

La velocidad del movimiento de la partícula está determinada por variables como la viscosidad del medio, la intensidad del campo eléctrico aplicado y la partícula – forma, carga y tamaño-,también influyen factores como la fuerza iónica y el pH del medio que afectan la carga neta de la partícula.
Al tener iguales condiciones de corrida, es decir, igual buffer- fuerza iónica- pH y viscosidad, el mismo campo eléctrico y la misma temperatura las partículas que tengan distinta carga y tamaño migraran a distinta velocidad así recorriendo distinta distancia en misma cantidad de tiempo.Para poder comparar distintas sustancias entre si en esta técnica habría que independizarse del campo eléctrico aplicado, para esto se utiliza la movilidad electroforética en vez de la velocidad de la partícula.
La movilidad electroforética es la velocidad que adquiere la partícula por unidad de campo eléctrico aplicado:

Cuando nosencontramos en una situación de equilibrio en donde la fuerza eléctrica será igual a la fuerza de rozamiento dicha movilidad se define como:


µ = (d . L)
(V . t)

En esta ecuación se puede observar q la movilidad dependerá de la carga de la partícula y del...