Observación de microorganismos

Observación de microorganismos
La observación microscópica se constituye en una técnica de gran importancia para el estudio de los microorganismos ya que permite conocer algunas de sus características, como son: forma, disposición o agrupación, presencia o ausencia de estructuras (cápsulas, esporas, flagelos), movilidad, entre otras. Existen numerosas técnicas para la observación microscópicade los microorganismos, de las cuales en el laboratorio son fáciles de realizar las siguientes:
1. Observación de microorganismos vivos

• en fresco
• con fondo oscuro
• gota pendiente
2. Observación de microorganismos muertos

• Técnica de fijación
• Tinción simple
• Tinción diferencial
• Tinción especial
3. Técnica de Microcultivo
1. Preparación de Frotis y observación demicroorganismos vivos
• Observación en fresco sin tinción. Este método de examen permite observar el microorganismo vivo y conocer sus características, morfología, color, tamaño real, movimiento, evita las deformaciones de su morfología producidas por que las técnicas de coloración y fijación.
Consiste en tomar con un asa previamente flameada una muestra del microorganismo a observar y colocarla enuna gota de líquido o suspensión sobre un portaobjeto sobre el cual a la vez se coloca suavemente un cubreobjeto, luego se procede a la observación microscópica. El material que es demasiado espeso para permitir la diferenciación de sus
elementos puede diluirse con igual volumen de solución salina fisiológica estéril.
Este tipo de preparación se emplea para detectar trofozoítos móviles deparásitos intestinales como Giardia entamoeba, huevos y quistes de otros parásitos, larvas y gusanos adultos, Trichomonas, hifas de hongos, Candida sp. etc.

En la foto se observa el protozoo Blastocystis hominis causante de una enteroparasitosis en pacientes con compromiso inmunológico.
http://sisbib.unmsm.edu.
pe/BVRevistas/anales/v64_n4/
images_paradigmas2.htm

• Gota pendiente Seutiliza un portaobjeto con un área de depresión (excavación) en el centro. En el borde de la excavación se deposita una fina película de vaselina; en la laminilla cubreobjetos se coloca una pequeña gota de la suspensión que contiene los microorganismos, luego se coloca la laminilla invertida con la suspensión sobre la depresión de la lámina portaobjetos teniendo cuidado que no haga contacto con losbordes o el fondo de la excavación. La vaselina impide la penetración de corrientes de aire y permite la adhesión del cubreobjeto al portaobjeto.
• Observación microscópica en fondo oscuro. Se utiliza para observar microorganismos vivos, en movimiento y sin teñir, y para visualizar para el contorno de bacterias muy pequeñas que no son posibles de observar en campo claro por su falta de contrastecon el medio.

Enterobius vermicularis:
huevos en fondo oscuro
http://sisbib.unmsm.edu.pe/
BVRevistas/anales/v64_n4/
images_paradigmas2.htm Los microorganismos se ven intensamente iluminados sobre un fondo oscuro. Para este tipo de observación se utiliza el microscopio óptico al que se le sustituye el condensador de Abbé por un condensador de fondo oscuro que debe ubicarse muy cerca dela preparación.

Se basa en el fenómeno de Tyndall, de reflexión luminosa. Se ilumina la preparación en forma oblicua, incidiendo los rayos luminosos directamente sobre los microorganismos sin penetrar en el objetivo del microscopio.
2. Observación de microorganismos muertos
Preparaciones fijas La técnica de fijación permite coagular el protoplasma de las células antes de su coloración. Seprocede de manera similar a las preparaciones en fresco, pero en vez de utilizar agua se utiliza lactofenol, formaldehído, ácidos u otro producto químico para fijar la preparación. Posteriormente, si es necesario, se procede a sellar con esmalte los bordes del cubreobjeto y se observa al microscopio. Esta técnica permite conservar por un largo tiempo las preparaciones en el laboratorio.
El...