Pcr Polymerase Chain Reaction

TALLER DE MEDICINA GENOMICA PCR

Contesta las siguientes preguntas:
1.- ¿Por qué se llama PCR?
Es una técnica de biología molecular que sirve para amplificar un gran número de copias de unfragmento de ADN en múltiples copias y las siglas significan Polymerase Chain Reaction (Reacción en cadena de la polimerasa)
2.- ¿En que se basa la amplificación exponencial?
Se basa en que por cada ciclode PCR se obtendrán 2 copias de cada fragmento de ADN que exista en la muestra.
3.- ¿Cómo se determina el tamaño del producto de PCR?
La detección del producto de la PCR se realiza normalmentemediante electroforesis, dependiendo de varios factores utilizaremos diferentes medios (agarosa, poliacrilamida) a distintas concentraciones.
4.- ¿Cuál es la sensibilidad de la PCR?
Tiene altasensibilidad para detectar moléculas pequeñas de hasta un 90%.
Tiene alta sensibilidad ya
5.- ¿Qué ventaja tiene Taq DNA polimerasa sobre otras DNA polimerasas?
Tiene una alta termoresistencia y no sedesgasta en tan pocos ciclos como otras polimerasas
6.- Menciona 5 ingredientes de una reacción de PCR
ADN en estudio, taq polimerasa, dNTP’s (dATP, dTTP, dCTP, dGTP, Buffers, MGCL2
7.-Menciona lastres fases de la PCR durante cada ciclo y que sucede durante cada una de ellas
1 Desnaturalización: aquí ocurre la separación de la doble hebra de ADN a una sencilla a una temperatura de 95 gradoscentígrados por 15 a 40 segundos.
2 Apareamiento: los primers se pegan a cada hebra de ADN a una temperatura de 55 grados centígrados por 30 segundos
3 Polimerización y extensión: colocación de los dNTP’sde 5’ a 3’ leyendo el DNA de 3’ a 5’

8.- Menciona 3 enzimas para un PCR de alta fidelidad
Tth, Tli y platimun Pfx pol.
9.- ¿Qué son los primers dimers y cómo se pueden evitar?
Son productospotenciales de la PCR donde un primer se une con otro sin amplificar la muestra de ADN que se desea.
10.- Describa brevemente en que consiste la RT-PCR
Reacción de cadena de polimerasa transcripción...