Pigmentación

FOTOSINTESIS
SEPARACIÒN DE PIGMENTOS
RESUMEN: Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.
Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes apolares, lo que permite su separación cuando unasolución de las mismas asciende por capilaridad a través de una tira de papel poroso (papel de cromatografía o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico (etanol), ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que éste asciende. Las menos solubles avanzarán menos en la tira de papel de filtro.Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo del material utilizado) que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseerán diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución.
INTRODUCCION
La fotosíntesis es una ruta metabólica que
OBJETIVOS
*Comprensión del papel imprescindible de los pigmentos vegetales, fundamentalme la clorofila, en el metabolismo vegetal
* Uso de técnicas de separación de sustancias.
* Reconocimiento de los principales pigmentos de las plantas, a partir de sus propiedades diferenciales respecto al color y la solubilidad.
MATERIAL
* HOJAS DE LECHUGA
* HOJAS DE BETABEL
* HOJAS DE ESPINACA
*HOJAS DE ACELGAS
* 250 ml DE ALCHOL ETILICO
* 250 ML DE ACETONA
* 250 ML DE GASOLINA BLANCA.
* 1 MORTERO.
* 1 EMBUDO
* 1 PAPEL FILTRO
* 1 TIGERAS
* 1 CAJA DE PETRI

PROCEDIMIENTO
1. Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas, quitando las nerviaciones más gruesas, junto con 10 o 15 cc de éter etílico.
2. Triturar sin golpear hasta queel líquido adquiera una coloración verde intensa (utilizar campana de gases a lo largo de toda la práctica).
3. Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es suficiente con 2 o 3 cc. de solución de pigmentos).
4. Colocar en la tapadera de una caja de Petri metanol absoluto hasta una altura de 0,5 a 1 cm.
5. Cortar una tira de papel de filtro de unos 8cms. de anchura y unos 10 a 15 cms. de altura.
6. Poner con el capilar en el papel de cromatografía entre 5 y 10 gotas de solución de pigmentos, espaciadas en el tiempo con el fin de que vaya secándose el éter etílico y aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas se pondrán siempre en el mismo punto (se puede marcar con un lápiz), situado a nos 2 cm por encima del borde inferior del papel.7. Doblar el papel cromatográfico a lo largo y colocarlo en la placa de petri con la mancha de pigmento a 1 cm. de la superficie del eluyente. Podemos sustituir la placa de petri por un vaso de precipitados y fijar el papel cromatográfico con una pinza a un soporte horizontal colocado en el borde del vaso (por ejemplo, una varilla de vidrio).
8. Esperar unos 30 minutos y observar.PROCEDIMIENTO
1. Extracción: trocear la hoja de espinaca. Introducir los trozos en un tubo de ensayo de calibre grueso y añadir 10 mL de etanol. Taparlo con algodón y calentarlo al baño ‘María’ durante aproximadamente 5 min (retirarlo cuando el etanol adquiera un color verde intenso). Verter el etanol con los pigmentos disueltos en otro tubo de ensayo.
2. Separación:
* Añadir al embudo decdecantación (con la llave cerrada) 5 mL de gasolina.
* Tomar 5 mL de extracto de pigmentos y añadirlos sobre el embudo de decantación. Se formarán dos fases (A y B)

* Añadir 2 mL de agua (o más, hasta que la fase inferior quede sin pigmentos).
* Desechar la fase inferior (B).
* Añadir en el embudo 3 mL de metanol 92% (v/v). Se formarán dos fases (C y D)....