Plaquetas Humanas

Traducción.

LAS PLAQUETAS HUMANAS SINTETIZAN Y EXPRESAN EL FACTOR TISULAR FUNCIONAL.
ABSTRACT: mRNA de TF y su proteína, como la actividad procoagulante TF-dependiente han sido detectados en plaquetas humanas, pero no hay evidencia directa de la síntesis de TF. Monocitos libres de plaquetas y no estimulados en la mayoría de los pacientes expresaron mRNA de TF, el cual fue aumentado oinducido luego de la activación plaquetaria. Ensayos de inmunoprecipitación revelaron la presencia de proteína TF (en su mayoría de un peso molecular de 47 kDa, con otras bandas de aproximadamente 35 y 60 kDa) en la membrana de plaquetas no estimuladas, la cual incrementó luego de la activación plaquetaria. Este incremento fue concomitante con la translocación de TF hacia la membrana plasmática, comodemuestran la inmunofluorescencia de microscopio confocal y la biotinilación de proteínas de membrana. La actividad procoagulante plaquetaria, evaluada con la generación de factor Xa (FXa), fue inducida luego de la activación y fue inhibida en un 48% y un 76% con anti-TF y anti-FVIIa, respectivamente, pero no por inhibidores de vía intrínseca. Las plaquetas incorporaron [35S]-metionina en lasproteínas TF con un peso molecular de aproximadamente 47, 35 y 60 kDa, más intensamente luego de la activación plaquetaria. La puromicina, pero no la actinomicina D (DRB), inhibió la neosíntesis de TF. Por lo tanto, las plaquetas humanas no sólo ensamblan las reacciones de coagulación en su membrana, sino que también suministran su propio TF para la generación de trombina en procesos circunscritosespacial y temporalmente. Estas observaciones simplifican, unen y proveen una formulación más coherente del actual modelo de hemostasia basado en células.
El factor tisular (TF) inicia la coagulación. TF se une al factor VIII/factor VIIa (FVIII/VIIa), y el complejo TF-VIIa activa a FX y FIX. La máxima expresión de actividad procoagulante (PCA) de TF es cuando está incorporado en membranasfosfolipídicas. La hiperfunción de TF desencadena desórdenes trombóticos. La cadena polipeptídica de TF tiene 263 aminoácidos, y pesa 30kDa; la proteína completamente glicosilada pesa 47kDa. Algunos autores consideran que el TF circulante es insuficiente para producir a tiempo un tapón hemostático, por tanto la coagulación sería desencadenada por TF de pared vascular. Los cambios en los niveles plasmáticosde factores de coagulación derivados de péptidos de activación en paciente con deficiencias de FVII y FXI sugieren que la coagulación es iniciada por una vía de transmisión sanguínea o sangre expuesta con TF-FVIIa. Hay un pool de células circulantes o microparticulas unidas a TF que son capaces de iniciar la coagulación. Los monocitos en reposo expresan TF no funcional, pero su interacción conplaquetas activadas y neutrófilos podría inducir la decodificación de TF y la libesacion de microparticulas derivadas de monocito que acarrean la proteína TF activa. Celulas endoteliales expresan proteína TF activa luego de estimulado o durante infecciones sistémicas. Hay síntesis de TF en neutrófilos. Las plaquetas estimuladas parecen exportar TF preformado desde sus granulos alfa y un sistemacanalicula abierto hacia la membrana plasmática, y la TF seria transferida desde plaquetas a monocitos. Las plaquetas anucleadas pueden sintetizar proteínas. En estas se ha encontrato pre-mRNA constitutivo y factores críticos capaces de empalmarlo luego de la activación plaquetaria. El tapon plaquetario es creado en sitios de lesión vascular, donde las plaquetas activadas cumplen el rol delocalización y control de las reacciones de coagulación. Si el TF funcional es producido por plaquetas, el modelo de hemostasis debe ser redefinido.

RESULTADOS:
1. El mRNA de TF está presente en plaquetas humanas y aumenta luego de la activación plaquetaria.
La estimulación con TRAP (colágeno o ADP) indujo un rápido incremento (dentro de 15 minutos) en el mRNA para TF en plaquetas. Se observó...