practica 7

PRÁCTICA N 7
MEDIOS DE CULTIVO
COMPETENCIA
Conoce la clasificación, preparación y esterilización de los medios de cultivo así como su distribución en diferentes recipientes.
INTRODUCCIÓN
Un medio de cultivo es cualquier “material o sustrato” que proporcione sustancias nutritivas que permitan el desarrollo y reproducción de microorganismos.
Estos pueden ser líquidos, sólidos osemisólidos (Apéndice A).
CLASIFICACIÓN DE MEDIOS
Los medios de cultivo pueden clasificarse en:
Naturales
Están constituidos por sustancias naturales, tales como papa, leche, huevos, sangre, etc.
Sintéticos
Están compuestos de sustancias que son manipuladas por el hombre en el laboratorio.
Estos a su vez se clasifican en:
 Composición química definida
 Composición químicaindefinida.
Hecho con sustancias químicas cuyos componentes no pueden analizarse o es difícil establecer su composición.
Un medio ampliamente usado en bacteriología es el caldo nutritivo, que no es más que una infusión de carne magra (sin grasa, tendones, aponeurosis, etc.). La carne puede ser de cualquier músculo incluyendo el corazón. En ocasiones y con el objeto de que tenga más productosnutritivos, se le agregan infusiones de cerebro, hígado, etc., que contienen ciertos factores nutritivos en mayor cantidad
También son muy usados los caldos peptonados, en los cuales la carne o leche es sometida a hidrólisis ácida o enzimática, obteniéndose entonces péptidos y aún aminoácidos en diversas proporciones incrementando de esta manera estos componentes que son más fácilmentemetabolizados.
Los caldos nutritivos pueden solidificarse con diversos agentes capaces de ser convertidos de “sol” a “gel” y viceversa. Uno de los más usados es un polisacárido complejo inatacable por las bacterias, muy higroscópico y que es extraído de ciertas algas rojas que existen en el Océano Pacifico. Este producto se llama agar. Una cantidad de 1.5 g agregados a 100mL de caldo es suficiente paraconvertirlo en una masa de consistencia gelatinosa, más bien dura.
Para que el agar sea disuelto necesita temperaturas de casi 100º C y al irse enfriando permanece en esta forma de “sol” hasta los 40º C. Por debajo de esta temperatura se transforma en una masa sólida (“gel”) que es estable así por tiempo indefinido.
También se cuenta con medios de cultivo semisólidos que son aquellos medioslíquidos a los que se les adiciona agar en bajas concentraciones: 0.4 a 0.8%. Éstos son útiles para determinar la movilidad de los microorganismos.
MEDIOS SELECTIVOS
Estos han sido diseñados de tal manera que inhiban el desarrollo de un grupo de organismos, mientras que permiten el desarrollo de otro grupo proveniente de una flora mixta.
La inhibición puede deberse a la alteración del pHde un medio sólido. También se puede incluir en un medio sólido de sustancias inhibidoras que dejen crecer ciertos tipos de bacterias pero no otras, sensibles a tal agente, teniendo entonces un medio que puede ser moderada o altamente selectivo, por ejemplo S-110 (Estafilococo 110), S.S. (Salmonella-Shigella) y S.D.A (agar de Sabouraud dextrosa), los cuales a la vez son diferenciales y selectivos.MEDIOS ENRIQUECIDOS
Son aquellos a los que se les pueden agregar sustancias para enriquecerlo, como por ejemplo gelosa nutritiva a la que se le agrega sangre, se denomina agar sangre, el cual puede ser utilizado en el aislamiento de bacterias muy exigentes en sus requerimientos nutricionales.
También se puede estudiar en este medio la acción de productos solubles bacterianos como lashemolisinas, en cuyo caso la colonia está rodeada de una aureola clara, donde estas enzimas han destruido los glóbulos rojos. Son ejemplos de medios enriquecidos: medio de suero de Loeffler para bacilos diftéricos, medio de Lowenstein-Jensen, para bacilos tuberculosos, caldo selenito cisteína y caldo tetrationato.

MEDIO DIFERENCIAL

Es aquel en el que se ha añadido alguna clase de indicador,...