Practica de biologia celular 2 uam

PRACTICA 2
MICROSCOPIA 2
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES Y DIVERSIDAD CELULAR
INTRODUCCION
Hasta mediados del siglo XX un gran número de microscopios de luz habían salido al mercado, destacando los microscopios de la firma Carl Zeiss. Esta firma logró la producción de microscopios de gran calidad, gracias a la aplicación de la teoría de formación de imágenes de Abbe, diseñando por primeravez un microscopio basado en cálculos matemáticos y conocimientos de óptica geométrica. No obstante, se presentaban problemas muy grandes al tratar de observar muestras transparentes a la luz visible, como es el caso de algunas células vivas.
En el año 1935, el físico holandés Fritz Zernike desarrolló el Microscopio de Contraste de Fase, con lo cual se le otorgó el Premio Nobel de Física en el año1953. Su contribución consistió al afirmar que la imagen vista bajo un microscopio convencional, es formada por el objetivo del microscopio, y finalmente se observa en el ocular. Si la muestra no absorbe la luz, no habrá esencialmente contraste en la imagen visible (será toda blanca); por ejemplo, la mayoría de las células vivas absorben poca luz (a excepción de las células rojas de la sangre ylos cloroplastos) y por lo tanto, son difíciles de visualizar a través de un microscopio convencional. Por otro lado, aunque las células absorben poca luz, tienen diversos espesores y diversos índices de refracción en sus partes, lo que conduce a las diferencias de fase de las ondas de luz que pasan a través de ellas. La fase de un haz de luz es inobservable a la vista (apenas se ve la intensidad,no la fase). Zernike calculó la manera de hacer que las diferencias de fase se observaran en la imagen como en la intensidad, logrando así, visualizar detalles que no eran posibles apreciar en un microscopio convencional
El microscopio de contaste de fases se utiliza principalmente en el estudio de células vivas sin alterar o sin teñir, así como también es de gran utilidad para observar célulascultivadas, cuyo crecimiento y división mitótica puede seguir se fácilmente
Existen células de una enorme variedad de formas y tamaños que representan su adaptación evolutiva a distintos ambientes o a diferentes funciones especializadas dentro de un organismo multicelular. El tamaño de la célula varia desde unas decimas de micrómetro como algunas bacterias hasta dimensiones de centímetros comolas yemas de huevo de algunas aves.

OBJETIVOS
Conocer el sistema de contraste de fases y su utilidad
Aprender a manejarlo
Examinar distintos tipos de células

MATERIAL
Material proporcionado por el laboratorio
1 microscopio de contraste de fases
Papel seda
3 pipetas Pasteur
1 vidrio de reloj
1 lanceta
2 ml de agua destilada
Piseta de etanol
Lente auxiliar
Aceite deinmersión
Algodón
2 ml de solución isotónica de NaCl 0.9%

Material proporcionado por el alumno

Un frasco chico de agua estancada
1 cebolla
1 sobre de levadura seca activa
1 navaja
Hisopillos
Portaobjetos
Cubreobjetos



METODO
I. Realice la iluminación de Köheler
II. A guste para el contraste de fase
1. Coloque el condensador en el numero que corresponda al aumento delobjetivo usando en 40 para objetivo 40X y en 100 el objetivo 100X (fig. 2)
2. Cambie un ocular por la lente auxiliar. Enfoque los dos círculos (anillo de fases y diafragma anular) separando las partes que componen la lente auxiliar
3. Centre los dos círculos utilizando los tornillos situados en la parte lateral del condensador
4. Retire la lente auxiliar, coloque nuevamente el ocular y afine elenfoque
5. Cada vez que cambie el objetivo (10X, 40X y 100X) debe de cambiar el condensador al número correspondiente y repetir el procedimiento antes mencionado.
NOTA:
a) Cada vez que haga una observación con el objetivó de 100X, deberá colocar sobre el cubreobjetos de la preparación una pequeña gota de aceite de inmersión; esto quiere decir que la lente del objetivo deberá quedar inmersa en el...