practica de laboratorio cuerpos cetonicos


LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PRACTICA N° 2
IDENTIFICACION DE CUERPOS CETONICOS EN ORINA


PRESENTADO POR:
MARIA DEL PILAR PASOS
JOSE DARIO ORTEGA
ELIANA MARTINEZ MONTIEL
CESAR USTA MACHADO




DOCENTE:
ORFA CONTRERAS



UNIVERSIDAD DEL SINU
MEDICINA
III SEMESTRE
GRUPO B
2013
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PRACTICA N° 2
IDENTIFICACION DE CUERPOS CETONICOS EN ORINAINTRODUCCION

En los seres humanos y en mayor parte de los mamíferos se posee la capacidad enzimática de desviar parte del acetil-COA procedente de la oxidación de los ácidos grasos a la formación de cuerpos cetonicos. Estos son los cuerpos cetonicos, los ácidos acetoacetico, la acetona, y el ácido β-hidroxibutirico.
En condiciones normales los cuerpos cetonicos se hallan el hígado y soncompletamente metabolizados y utilizados para suministrar energía al corazón y al cerebro en situaciones especiales de tal manera que pequeñas cantidades son encontradas en la sangre y orina; por el contrario en el caso de los diabéticos no sometidos a tratamiento se producen grandes cantidades de cuerpos cetonicos esto se debe principalmente a los niveles insuficientes de insulina que no puedencaptar la glucosa de la sangre para convertirla en combustible o en grasas esto trae como consecuencia la disminución de malonil-COA que es el producto de partida de la síntesis de ácidos grasos, también desaparece la inhibición de la Carintia aciltransferasa I y los ácidos grasos entran a la mitocondria para ser degradados a acetil-COA el cual no puede pasar a través del ciclo del ácidocítrico puesto que los intermediarios del ciclo han sido eliminados para su uso como sustratos en la gluconeogénesis dando así una acumulación de acetil-COA resultando la formación de cuerpos cetonicos.
En esta práctica de laboratorio determinaremos la formación de cuerpos cetonicos en la orina en pacientes con diabetes no tratada por medio del cual utilizaremos 3 métodos que sirven para detectarla presencia de cuerpos cetonicos en la orina; Método de Imbert, método de Hart y el método de gerhadt que utilizan la coloración de los cuerpos cetonicos con colores específicos para determinar si hay cuerpos cetonicos en la orina





BIOSÍNTESIS
Los cuerpos cetonicos se forman a partir de acetil-coa libre en el hígado esta formación tiene lugar en la matriz mitocondrial. Elacetoacetato es la fuente principal de los demás cuerpos cetonicos se forma a partir de del acetoacetil-COA cierta cantidad de este procede de las 4 últimos átomos de carbono de un ácido graso de cadena larga.

La biosíntesis de los cuerpos cetonicos se dan en 3 pasos enzimáticos que dan lugar a la formación de cuerpos cetonicos
1 El paso de la formación de acetoacetato en el hígado es lacondensación enzimática de dos moléculas de acetil-COA catalizada por la TIOLASA el acetoacetil se condensa con acetil-COA para formar el β-hidroxi-β-metilglutaril-COA








2 El segundo paso de la biosíntesis el β-hidroxi-β-metilglutaril-COA se rompe formando acetoacetato libre y el acetil-COA libre

















3 Y por último el acetoacetato es reducidoreversiblemente a β-hidroxibutirato por acción de la enzima mitocondrial β-hidroxibutirato deshidrogenasa y por otro lado el acetoacetato es convertido a acetona por la enzima acetoacetato descarboxilasa















OBJETIVOS

Determinar la presencia de cuerpos cetonicos en orina mediante pruebas cualitativas para cada uno de ellos

Familiarizarse con algunos protocolos empleados enel laboratorio clínicos para el reconocimiento de cuerpos cetonicos










METODOLOGIA Y RESULTADOS

Determinación de acetona
1 A 5 ml de orina le agregamos 0.5ml de nitropusiato de sodio disuelto al 5% en ácido acético al 50%, adicionamos 0.5ml de amoniaco por las paredes del tubo
Para la determinación de la acetona en la orina utilizamos el método de Imbert este método se...