PRACTICA QUIMICA ANALITICA

1. OBJETIVO
Este procedimiento establece el método para determinar el contenido de cafeína por cromatografía de líquidos con detector UV/vis.
2. CAMPO DE APLICACIÓN
Este procedimiento es aplicable en diferentes matrices tales como, café soluble, café insoluble, café descafeinado, bebidas energizantes y comprimidos.
3. FUNDAMENTO
La muestra es pesada, extraída y disuelta en agua. Laconcentración del contenido de cafeína en la muestra se determina al inyectar directamente la muestra al cromatógrafo de líquidos con detector UV/vis para su detección. Previamente es preparada e inyectada, una curva de calibración de Cafeína, donde se debe justificar su correcta linealidad para poder cuantificar. Es importante mencionar que los eluentes como cualquier muestra o estándar que esintroducido al equipo, debe ser previamente filtrado a un poro de 0.45 µm.
4. DEFINICIONES
4.1 Agua reactivo.- Es un agua que tiene un valor de resistencia de por lo menos 0.2 megaohms (conductividad máxima 5.0 micromhos/cm) a 25 °C, y un pH de 5 a 8.
4.2 Blanco.- Agua reactivo o matriz equivalente a la que no se le aplica ninguna parte del procedimiento analítico y sirve para evaluar la señal defondo instrumental o la medición analítica.
4.3 Cafeína.- La cafeína es un alcaloide del grupo de las xantinas, sólido cristalino, blanco y de sabor amargo, que actúa como una droga psicoactiva, levemente disociativa y estimulante por su acción antagonista no selectiva de los receptores de adenosina. Formula: C8H10N4O2. Peso molecular: 194.19 g/mol. Punto de ebullición: 178 °C. Densidad; 1.23 g/ml.Cas: 58-08-2.
4.4 Calibración.- Conjunto de operaciones que establecen, bajo condiciones específicas, la relación entre los valores de una magnitud indicados por un instrumento o sistema de medición, o los valores representados por una medida materializada y los valores correspondientes de la magnitud, realizados por los patrones, efectuando una corrección del instrumento de medición parallevarlo a las condiciones iniciales de funcionamiento.


4.5 Comprimido.- Forma farmacéutica sólida que contiene uno o varios principios activos con actividad terapéutica y excipientes, formulado en tamaño y forma para un adecuado uso. Se obtienen aglomerando, por compresión, un volumen constante de partículas. Tienen grandes cualidades de almacenamiento y seguridad de dosis para el uso del paciente.4.6 Duplicado de muestras.- Una de dos o más muestras o submuestras que se obtienen separadamente en el mismo sitio, al mismo tiempo y con el mismo procedimiento de muestreo.
4.7 Elución isocrática.- Se denomina así, cuando la composición del disolvente se mantiene constante a través de toda la corrida analítica.
4.8 Elución por gradiente.- Se denomina así, cuando la composición deldisolvente se cambia de alguna forma (pH, fuerza reguladora, mezcla con otros disolventes).
4.9 Fase Normal en HPLC.- La fase estacionaria es de elevada polaridad tal como el trietilenglicol colocada sobre partículas de sílice o alúmina, y la fase móvil de menor polaridad que la fase estacionaria (columna polar, fase móvil no polar).
4.10 Fase Reversa en HPLC.- La fase móvil es relativamente polar yla fase estacionaria no polar (columna no polar, fase móvil polar). La fase estacionaria con frecuencia se trata de un hidrocarburo y la fase móvil puede ser como por ejemplo el agua, el metanol o el acetonitrilo.
4.11 Lote de muestras.- Un grupo de muestras tratadas bajo un mismo procedimiento, las cuales se procesan como una unidad. Siendo el lote analítico de una muestra a un máximo de 20muestras.
4.12 Material de referencia certificado (MRC).- Es un material o sustancia en la cual han sido certificadas una o más de sus propiedades, por un procedimiento técnicamente validado y que es acompañado por, o trazable a, un certificado o documento emitido por un organismo certificador técnicamente competente, en el cual los valores certificados son acompañados de la incertidumbre asociada...