Practicas De Ecologia Microbiana

Práctica 10. Microorganismos del ciclo del nitrógeno. |
Laboratorio de Ecología Microbiana |


Objetivos
* Determinar experimentalmente los principales procesos metabólicos involucrados en el ciclo del nitrógeno.
* Enumerar las formas fisiológicas de las bacterias involucradas en estos procesos, en diferentes muestras de suelo.
Resultados
Tabla 1. NMP/g en base húmeda y en baseseca de microorganismos representantes de amonificación en suelo rizosferico.
Equipo | Estación | % H | 10-1 | 10-2 | 10-3 | Numero característico | NMP/g BH | NMP/g BS |
1 | 1 | 7 | 3 | 1 | 0 | 3,1,0 | 43 | 46 |
2 | 3 | 20 | 3 | 0 | 1 | 3,0,1 | 49 | 61.25 |
3 | 5 | 12 | 1 | 0 | 0 | 1,0,0 | 36 | 4.69 |
4 | 6 | 13 | 3 | 3 | 1 | 3,3,1 | 460 | 328.73 |
5 | 7 | 9 | 2 | 2 | 0 | 2,0,0 | 9.1x102| 1x103 |
6 | 7 | 41 | 2 | 2 | 0 | 2,0,0 | 9.1 | 15.42 |

Tabla 2. NMP/g en base húmeda y en base seca de microorganismos representantes de nitrificación en suelo rizosferico.
Equipo | Estación | % H | 10-1 | 10-2 | 10-3 | Numero característico | NMP/g BH | NMP/g BS |
1 | 1 | 7 | 2 | 1 | 1 | 2,1,1 | 20 | 21 |
2 | 3 | 20 | 3 | 2 | 2 | 3,2,2 | 210 | 26.25 |
3 | 5 | 12 | 3 | 2 | 3 |3,2,3 | 290 | 3.29x102 |
4 | 6 | 13 | 2 | 1 | 0 | 2,1,0 | 15 | 17.24 |
5 | 7 | 9 | 3 | 3 | 3 | 3,3,3 | >1.1x102 | >1.2x102 |
6 | 7 | 41 | 3 | 3 | 3 | 3,3,3 | >1.1x102 | >1.8x102 |

Equipo | Estación | % H | 10-3 | 10-4 | 10-5 | Numero característico | NMP/g BH | NMP/gBS |
1 | 1 | 7 | 3 | 3 | 3 | 3,3,3 | >1.1x105 | 1.26x105 |
2 | 3 | 20 | 0 | 2 | 2 | 0,2,2 | 3.5x103 |4.37x103 |
3 | 5 | 12 | 3 | 3 | 3 | 3,3,3 | >1.1x105 | 1.25x105 |
4 | 6 | 13 | 3 | 3 | 3 | 3,3,3 | >1.1x105 | 1.26x105 |
5 | 7 | 9 | 0 | 0 | 0 | 0,0,0 | <3x102 | < 3.2x102 |
6 | 7 | 41 | 1 | 0 | 0 | 1,0,0 | 3.6x102 | 6.10x102 |
Tabla 3. NMP/g en base húmeda y en base seca de microorganismos representantes de desnitrificación en suelo rizosferico.

Figura 1. Grafica del Log deNMP/g en base seca de microorganismos representantes de amonificacion, nitrificación y desnitrificacion en suelo rizosferico de cada estación.
Tabla 4. UFC/g en base húmeda y en base seca de microorganismos representantes de proteólisis en suelo rizosferico.
Equipo | Estación | Dilución | N° de colonias | UFC/g BH | UFC/g BS |
1 | 1 | 10-4 | 39 | 3.9 x106 | 4.1 x106 |
2 | 3 | 10-3 | 11 | 1.1x105 | 1.37 x105 |
3 | 5 | 10-4 | 5 | 5 x105 | 5.68 x105 |
4 | 6 | 10-4 | >10000 | > 1 x105 | > 1.14 x105 |
5 | 7 | 10-2 | 2.5 | 2.5 x103 | 2.74 x103 |
6 | 7 | 10-3 | 3 | 3 x104 | 5 x104 |

Figura 2. Grafica del Log de UFC/g en base seca de microorganismos representantes de proteólisis en suelo rizosferico de cada estación.
Discusión
El proceso de amonificacion consiste enconvertir el nitrógeno orgánico (R-NH2) a amonio, que es de fácil asimilación para los microorganismos y organismos vegetales. Este proceso se manifestó en el laboratorio con un medio de cultivo de color naranja que contiene rojo de fenol, un indicador de pH y una fuente orgánica de nitrógeno, la urea, entre otras sustancias. La prueba es positiva cuando el medio se vuelve de color rosa intenso debidoa la amonificacion microbiana: al alcalinizar el medio por la producción de NH4+ vira el indicador y se demuestra este proceso del ciclo del nitrógeno.
El proceso de nitrificación, particularmente el de nitritacion, consiste en convertir el amonio en nitritos mediante la acción microbiana. Este proceso se manifestó con un medio de cultivo que contiene entre otras sustancias una fuente de amonio[(NH4)2SO4]. Cuando las bacterias nitrificantes producen nitritos, este ion se detecta añadiendo ácido sulfanilico y α-naftilamina produciendo una coloración roja en el medio.
La desnitrificacion conlleva una serie de reacciones de reducción en cadena a partir del nitrato y puede tomar dos vías, da como resultado nitrógeno molecular en una de ellas o llegar hasta a amonio en la otra. En el...