Practicas De Saneamiento

PROCEDIMIENTO RECUENTO DE MICROORGANISMOS POR EL MÉTODO DE TORUNDA EN SUPERFICIE

Objetivo
Conocer la carga microbiana en una superficie determinada en un volumen conocido de líquido.

Fundamento
Es un procedimiento de lavado con torunda (hisopado) de un área conocida de la superficie a investigar, limitada por una plantilla. Los microorganismos recogidos por la torunda se recuperan en unvolumen conocido de líquido con el que se realiza el recuento bacteriano.

Materiales
Plantilla de aluminio de 25 cm2 estéril
Tórula estéril de algodón no absorbente de 0,5 cm de diámetro por 2 cm de largo
sobre un aplicador de madera de 12 a 15 cm de largo
Tórulas estériles de alginato de calcio o rayón también pueden ser usadas
Placas Petri
Pipetas estériles de 1 y 5 mL

Reactivos ymedios de cultivo
Solución de hexametafosfato de sodio al 1%, sodio glicerolfosfato o citrato de sodio
cuando se utilicen tórulas de alginato de calcio las cuales sus fibras son solubles en
estas soluciones acuosas.
Medio de transporte si se requiere.
Frasco pequeño con tapa de rosca y con 5 perlas de vidrio de 3 mm de diámetro con
10 mL de Diluyente de máxima recuperación (MRD) o soluciónRinger al cuarto de
concentración estéril. Si se utilizan tórulas de alginato de calcio, se requieren frascos de 7 a 10 cm de largo con 4,5 mL del buffer de enjuague.

Nota: si se muestrea superficies que han sido higienizadas, se debe usar diluyente con algún neutralizante como: 0,05 % de tiosulfato de sodio que neutraliza el cloro; 0,5% polisorbato (Tween 80) más 0,07% de lecitina de soya,neutralizando el polisorbato los compuestos fenólicos y la lecitina los amonios cuaternarios
Agar Estándar u otro medio de cultivo apropiado según los microorganismos de
interés

Equipos
Incubadora regulada a 35°C ± 1°C

Desarrollo
Toma de muestra:

1. Abrir asépticamente el contenedor estéril con la tórula, tomar la torula por la parte apical del aplicador de madera, cuidando de no tocarninguna parte que será insertada en el frasco.
2. Abrir el frasco con el diluyente en forma aséptica.
3. Sumergir una torunda o tórula de algodón en una alícuota de 10 mL de diluyente (MRD líquido de Ringer al cuarto de concentración o solución reguladora) contenido en un frasco pequeño o tubo de tapa rosca, que contiene de 5 perlas de vidrio pequeñas (3 mm de diámetro).
4. Si seutilizan tórulas de alginato de calcio sumergir la tórula en un alícuota de 4,5 mL de la solución buffer de enjuague.
5. Si se han utilizado higienizantes para limpiar la superficie, el diluyente debe contener algún neutralizante de los mencionados en la Nota.
6. Escurrir el exceso de líquido de la torunda apretándola contra la pared del frasco o tubo y mantener firmemente la plantilla estérilsobre la superficie a muestrear.
7. Frotar con la cabeza de la torula en un ángulo de 30°, toda la zona de muestreo (25 cm2) girándola en tres direcciones para aumentar al máximo su capacidad de recoger microorganismos.
8. Romper la torunda, y el extremo algodonoso dejarlo caer en los 10 mL o 4,5 mL de diluyente contenido en el frasco, envase o tubo.
9. Tomar una segunda torunda yrepetir la frotación del área como antes.

Diagrama de flujo






















Referencias

APHA (2001) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of foods”. Fourth edition,.Capítulo 3.51

Roberts D., Hooper W., Greenwood M.(1995). Microbiología práctica de los alimentos. Editorial Acribia

NOM-093-SSA1-1994, Prácticas de Higiene y Sanidad en laPreparación de Alimentos que se ofrecen en los Establecimientos fijos.

NOM-120-SSA1-1994
Bienes y servicios. Prácticas de higiene y sanidad para el proceso de alimentos, Bebidas no alcohólicas y alcohólicas.


ANÁLISIS BACTERIOLOGICO DE UTENSILIOS

Objetivo:
Determinar que tan limpios o bien lavados se encuentran los utensilios de uso común en los alimentos.

Fundamento.
Esta práctica se...