PRECIPITACION, SEPARACION Y PUNTO ISOELECTRICO DE PROTEINAS

INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRACTICA 3
PRECIPITACION, SEPARACION Y PUNTO ISOELECTRICO DE PROTEINAS


GRUPOINTRODUCCIÓN
La solubilidad de una proteína está en función de la composición iónica del medio, el pH, la temperatura y la constante dieléctrica los grupos polares iónicos delas proteínas entran en interacción electrostática dentro de la misma molécula y con moléculas circundantes con tendencia a formas agregados lo cual disminuye su solubilidad. Esta interacción disminuyeen disolventes con altas constantes dieléctricas como el agua, pues al estar en interacción las proteínas tienden a solubilizarse. Así la adición de un disolvente orgánico como la acetona, o alcohola una solución de proteína y agua disminuye la constante dieléctrica del agua por lo que la solubilidad de la proteína disminuye y precipita. Cuando a un sistema proteico se le adicionan salesneutras en concentraciones menores a 1.0 M, las proteínas incrementan su solubilidad, esto se conoce como “salting in” se debe a las fuerzas de atracción entre los iones de la proteína y los de la sal. Aconcentraciones mayores que 1.0 M, tienden a precipitar esto se conoce como “salting out” esto es porque disminuyen las interacciones entre la proteína y el agua así aumenta la interacción proteína-proteína, lo que baja la movilidad de las cargas proteicas y las proteínas precipitan.
El punto isoeléctrico de una proteína se define como el pH en el cual el número de cargas positivas se igualaal número de cargas negativas la proteína existe en forma de ion dipolar o “zwiterion”. En el punto isoeléctrico la carga neta de la molécula es cero 0.
OBJETIVOS
Observar los efectos de algunosagentes fisicoquímicos sobre la solubilidad de las proteínas.
Determinar el punto isoeléctrico de la insulina, basándose en sus propiedades de solubilidad a diferentes valores de pH.

RESULTADOS...