Preparación de medios de cultivo, siembra y aislamientos de microorganismos

| | Nombre i apellidos |CURS |GRUP |
|Departamento de Química |Eduardo Berenguel Bernabé | | |
|Escola Municipal de Treball | | ||
|GRANOLLERS | | | |
| | |1 |1 |
| DATA DE ENTREGA |7/11/11 |Cicle Formativo de Grado Superior|NOTA |
| | |Laboratorio de análisis i Control de cualidad | |
| DATA DE INICIO |5/10/11 | | |
| DATA DE FINALIZACIÓN |26/10/11 || |
| Título de práctica |N. pràctica |
|Preparación de medios de cultivo, siembra y aislamientos de microorganismos. | |


RESULTADOS

6.8g de agar columbia para 8 placas
10.48g de agar sabourot para 8 placas.
91colonias
Nº de ufc/ml: 9.100.000
Microorganimos Klebsiella y Escherichia coli encontrados en la Siembra esocesa.


OBJETIVOS

- Aprender a preparar los principales medios de cultivos.
- Saber aislar, separar y diferenciar los microorganismos.
- Aplicar la técnica de recuento viable por banco de diluciones.
- Conseguir colonias aisladas por el método de la siembra escocesa.PROCEDIMIENTO


Preparación de medio de cultivo

- Preparación de 8 placas “Agar Columbia” y 8 placas “Agar Sabourot”, primero haremos unos cálculos según las concentraciones que tenga cada Agar (g/l), para saber cuántos gramos hemos de diluir, sabiendo que cada placa de petri debe tener 20ml.


- Cuando hallemos los cálculos respectivos, prepararemos el medio de cultivo agarColumbia. Para crear dicho medio de cultivo, cogeremos una probeta que contenga H2O con volumen de 160ml y un vaso de precipitados con 6.8g de agar Columbia, con una varilla de vidrio procedemos a diluir poco a poco el H2O con el respectivo Agar.


- Diluida, dicha cantidad, la traspasamos a una cazuela, para que se disuelva completamente, al hervirlo a una temperatura de 100 ºCaproximadamente, ayudándonos con una varilla de vidrio para agitarlo.


- Una vez hervido, pasamos el agar Columbia, a una probeta para medir su volumen, en este caso al necesitar 160ml, lo que nos falte lo rellenamos con H2O destilada. Ya obtenidos los 160ml de agar, procedemos a pasarlos a una botella de vidrio con capacidad de 1L, para ponerlo en el autoclave y esterilizarlo a 1atm, durante untiempo de 20min.


- Dicha botella una vez esterilizada por el autoclave, la enfriamos con agua del grifo y procedemos a rellenar las 8 placas de petri hasta recubrirlas, en una zona aséptica creada con la llama del mechero, dejando conservar a una temperatura ambiente.



Siembra y aislamiento de microorganismos

- Procederemos a hacer un aislamiento por diluciones decimales “Bancode diluciones”, del recipiente que contiene la masa microbiana denominada inóculo. Rotulando primero los tubos ringer con el factor de dilución 10-1, 10-2, 10-3, 10-4.


- Utilizando la pipeta, que debe de estar previamente esterilizada, que contienen un algodón en la boquilla para proteger de la aspiración, cogemos 1ml de la muestra y lo depositamos en el tubo de Ringer que contiene...