Preparación De Medios De Cultivo

Preparación de medios de cultivo nutritivos o de enriquecimiento
Agar Letheen modificado

Composición:

Agar Letheen | 32.0 g |
Peptona de caseína | 5.0 g |
Peptona de carne | 10.0 g |
Extracto de levadura | 2.0 g |
Bisulfito de sodio | 0.1 g |
Cloruro de sodio | 5.0 g |
Agar | 5.0 g |
Agua | 1000.0 ml |

Preparación:

Mezclar los componentes y calentar conagitación hasta la disolución completa del agar. Esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15 minutos.
El pH final después de esterilizar debe ser 7.2 ± 0.2

Caldo Letheen modificado

Composición:

Caldo Letheen | 26.7 g |
Peptona de caseína | 5.0 g |
Peptona de carne | 10.0 g |
Extracto de levadura | 2.0 g |
Bisulfito de sodio | 0.1 g |
Agua | 1000.0 ml |

Preparación:Mezclar los componentes hasta la disolución completa y distribuir 95 ml en botellas con tapón de rosca para dilución. Esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15 minutos.
El pH final después de esterilizar debe ser 7.2 ± 0.2

Agar papa dextrosa

Composición:

Infusión de papa | 200.0 ml |
Dextrosa | 20.0 g |
Agar | 15.0 g |
Agua | 1000.0 ml |

Preparación:

Suspender losingredientes en un litro de agua agitando, remojar de 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente y hervir durante un minuto. Esterilizar a 121ºC durante 15 minutos. Antes de usarse se licua, se enfría a 45-50ºC, se ajusta el pH a 3.5 con una solución de ácido tartárico al 10%
El pH final después de esterilizar debe ser 5.6 ± 0.2.

Base de caldo tetrationato

Composición:

Mezcla depeptonas | 5.0 g |
Mezcla de sales biliares | 1.0 g |
Carbonato de calcio | 10.0 g |
Tiosulfato de sodio | 30.0 g |
Agua | 1000.0 ml |

Preparación:

Suspender el medio deshidratado en un litro de agua. Mezclar bien y calentar a ebullición. Dejar enfriar y envasar en tubos de ensayo estériles, en volúmenes de 10 ml cada uno.
Guardar en refrigeración. No esterilizar en autoclave.Momentos antes de usarlo agregar 0,2 ml (de 3 a 4 gotas) de la solución yodo-yoduro.
El pH final debe ser 7.0 ± 0.1

Caldo Dextrosa Sabouraud

Composición:

Polipeptona o neopeptona | 10.0 g |
Dextrosa | 40.0 g |
Agua | 1000.0 ml |

Preparación:

Suspender el medio deshidratado en un litro de agua. Remojar de 10 a 15 minutos. Mezclar bien hasta obtener una suspensión uniforme.Calentar agitando frecuentemente durante un minuto. Distribuir y esterilizar a 121ºC durante 15.
El pH final después de esterilizar debe ser 5.6 ± 0.2

Preparación de medios de cultivo selectivos y diferenciales.

Agar MacConkey

Composición:

Digerido pancreático de gelatina | 17.0 g |
Digerido péptico de tejido animal | 1.5 g |
Digerido pancreático de caseína | 1.5 g |
Lactosa |10.0 g |
Mezcla de sales biliares | 1.5 g |
Cloruro de sodio | 5.0 g |
Agar | 13.5 g |
Rojo neutro | 0.03 g |
Cristal Violeta | 0,001 g |
Agua | 1000.0 ml |

Preparación:

Suspender el medio deshidratado en 1 000 ml de agua, remojar de 10 a 15 minutos y calentar a ebullición agitando continuamente. Hervir durante un minuto, esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15minutos. Enfriar a 45-50ºC y vaciar en cajas Petri unos 20 ml por placa. Dejar solidificar y luego invertir las cajas para evitar que se deposite un exceso de humedad en la superficie del medio.
El pH final después de esterilizar debe ser 7.2 ± 0.2

Agar de sal y manitol

Composición:

Digerido pancreático de caseína | 5.0 g |
Digerido péptico de tejido animal | 5.0 g |
Extracto de carne| 1.0 g |
D-manitol | 10.0 g |
Cloruro de sodio | 75.0 g |
Agar | 15.0 g |
Rojo de fenol | 0.025 g |
Agua | 1000.0 ml |

Preparación:

Suspender el medio deshidratado en un litro de agua y remojar 15 minutos. Mezclar y calentar a ebullición durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15 minutos. Distribuir porciones de 20 ml en cajas Petri de 15x100 mm.
El pH...