Preparacion y disolucion de muestras

NMX-F-286-1992. ALIMENTOS. PREPARACIÓN Y DILUCIÓN DE MUESTRAS DE
ALIMENTOS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS. FOODS. PREPARATION AND
DILUTION OF FOOD SAMPLES FOR MICROBIOLOGICAL ANALYSIS. NORMAS
MEXICANAS. DIRECCIÓN GENERAL DE NORMAS.
PREFACIO
En la elaboración de esta Norma participaron las siguientes Dependencias, Instituciones y
Organismos:
Secretaría de Salud
Laboratorio Nacional deSalud Pública.
Secretaría de Comercio y Fomento Industrial
Laboratorios Nacionales de Fomento Industrial
Secretaría de Hacienda y Crédito Público
Laboratorio Central de la Dirección General de Aduanas
Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Química
Leche Industrializada CONASUPO, S.A.
Instituto Nacional delConsumidor
Cámara Nacional de la Industria de Transformación
Cámara de Productos Alimenticios Elaborados con Leche
Sigma Alimentos, S.A. de C.V.
1. INTRODUCCIÓN
Independientemente del grupo de microorganismos que se pretenda enumerar, el
procesamiento de la muestra y la preparación de las diluciones debe realizarse con estrecho
apego a las directrices que se describen a continuación.
Elincumplimiento de estas condiciones dará lugar a variaciones importantes en los
resultados hasta el punto de resultar inutilizables. Así, no es posible comparar los resultados
entre 2 laboratorios que trabajan en la misma muestra con un manejo diferente de la técnica
de análisis, ni es posible interpretar los resultados sucesivos de un laboratorio, si no se
observan en cada ocasión las normasprecisamente en los términos descritos.
2. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN
Esta Norma especifica el procedimiento mediante el cual debe hacerse la preparación y la
dilución de muestras de alimentos para análisis microbiológico.
3. REFERENCIAS
RECOPILADO POR:
EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOSEsta Norma se complementa en la siguiente Norma Mexicana:
NMX-F-285 Muestreo y transporte demeustras de alimentos para su análisis
microbiológico.
4. REACTIVOS Y MATERIALES
4.1 Reactivos
Los reactivos que a continuación se mencionan, deben ser grado analítico. Cuando se
indique agua debe entenderse agua destilada.
Solución de Hidróxido de sodio 1 N.
Agua peptonada
a) Solución reguladora de fosfatos
b) Agua peptonada
4.1.1 Preparación de reactivos
4.1.1.1 Solución de Hidróxidode sodio 1N.
Fórmula:
Hidróxido de sodio 4g
Agua 100ml
• Disolver el Hidróxido de sodio y aforar a 100cm³ con agua.
4.1.1.2 Soluciones diluyentes
4.1.1.2.1 Solución reguladora de fosfatos
Fórmula:
KH2PO4 34 g
Agua 500 ml
• Disolver el fosfato en el agua y ajustar el pH a 7.2 con hidróxido de sodio 1 N.
• Llevar a un litro con agua
• Esterilizar durante 20 minutos a 121ºC.Conservar en refrigeración.
• Tomar 1.25ml de solución concentrada y llevar a un litro con agua. Esta es la solución
de trabajo.
• Distribuir en porciones de 99, 90 y 9ml según se requiera
• Esterilizar a 12°C durante 20 minutos.
4.1.1.3 Agua peptonadaFórmula:
Peptonada 1.0 g
NaCl 8.5 g
Agua 1.0 L
• Disolver los componentes en un litro de agua.
• Ajustar el pH a 7.0 conhidróxido de sodio 1 N.
• Distribuir en porciones de 99, 90 y 9 ml según se requiera.
• Esterilizar al 121°c durante 15 minutos.
4.2 Materiales
Todo el material que tenga contacto con las muestras de microorganismos debe estar estéril.
• Pipetas bacteriológicas de 10ml y 1ml (graduadas en 0.1 y 0.01ml respectivamente).
• Frascos de vidrio de 250ml.
• Tubos de 16 X 150mm con tapón rosca.
•Utensilios esterilizables para la presentación de las muestras: cuchillos, pinzas, tijeras,
cucharas, espátulas.
5. APARATOS E INSTRUMENTOS
• Horno para esterilizar con regulador de temperatura.
• Autoclave con termómetro o manómetro probado con termómetro de máximas.
• Baño de agua con termostato y termómetro.
• Licuadora de 1 ó 2 velocidades controladas por un reostato y/o stomacher.
•...