procedimiento

PREPARACIÓN Y TINCIÓN DEL FROTIS SANGUÍNEOS

PROPÓSITO:
Obtención de un frotis sanguíneo coloreado para el reconocimiento de los elementos celulares de la sangre.
MUESTRA REQUERIDA:
Sangrecapilar o venosa recién extraída sin anticoagulante o sangre con anticoagulante EDTA.
MATERIAL Y REACTIVOS:
Portaobjeto de vidrio con extremo esmerilado.
Alcohol etílico al 70%.
Torunda de algodón.Marcador de vidrio.
Bandeja o soporte para la coloración.
Aceite de inmersión.
Reloj marcador.
Perilla de hule.
Papel toalla.
Guantes descartables.
Solución de Wright.
Buffer pH 6.8.PROCEDIMIENTO:
1. Antes de utilizar los portaobjetos de vidrio, limpiarlos con alcohol y aclarar con agua.
2. Identificar la lámina adecuadamente en el extremo del portaobjeto (parte esmerilada).
3.Colocar en el portaobjeto una pequeña gota de sangre de 2 mm de diámetro a una distancia de 2 a 3 mm del extremo del portaobjeto y hacer rápidamente el extendido.
4. Para evitar la coagulación; se puedeutilizar sangre con EDTA. (Siempre conviene realizar cuando menos dos frotis).
5. Poner la lámina extensora a un ángulo de 45° del portaobjeto y moverla hacia atrás para que haga contacto con lagota, que debe extenderse rápidamente.
6. El extendido debe tener unos 30 mm. de largo. (Anexo 6).
7. Dejar secar a temperatura ambiente.
8. Colocar la preparación de sangre, completamente seca,sobre un soporte. (no necesita fijación previa pues el metanol del Wright fija la preparación).
9. Cubrir todo el frotis con coloración de Wright y dejarlo en reposo 3 minutos (o el tiempo necesariosegún la maduración del colorante).
10. Agregar una cantidad igual de buffer (pH 6.8) evitando derramar el Wright, mezclar con una perilla de hule con suavidad para asegurar una mezcla uniforme,aparecerá una película verde metálico, dejarlo en reposo por 5 minutos o el tiempo necesario según la maduración del Wright.
11. Lavar la lámina con agua de chorro hasta quitar el exceso de la mezcla....