Procesos Biotecnologicos

Tutoría 1ª Diseño de Biorreactores Grado en Bioquímica

PRIMERA PRÁCTICA HIDRÓLISIS DE LACTOSA EN LECHE
Obtención de los datos tiempo-concentración a partir de las áreas de pico de los cromatogramas.
De los cromatogramas se obtienen valores para las áreas de los picos de lactosa, galactosa, glucosa y fructosa. Dichas áreas están relacionadas con las concentraciones a través de calibrados parael sustrato lactosa y para los productos galactosa y glucosa. Como ejemplo, el calibrado de lactosa representa la relación [lactosa]/[fructosa] frente a la relación área de lactosa/área de fructosa. La fructosa se emplea como patrón interno, y está en todas las muestras en una concentración fija: 2 g/L. Conocida la relación de áreas, se aplica el calibrado y se estima la relación deconcentraciones. Conocida esta última, se estima la concentración de lactosa al saber la de fructosa. Es igual con los calibrados de glucosa y galactosa. Las concentraciones obtenidas son las del vial. Las del reactor se obtienen multiplicando las del vial por el factor de dilución: 0,2/(0,2+4)=21.

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PRIMERA PRÁCTICA HIDRÓLISIS DE LACTOSA EN LECHEObtención de los datos tiempo-concentración a partir de las áreas de pico de los cromatogramas. Calibrado de lactosa.
Calibrado de lactosa (Clac/Cfru vs. Alac/Afru)
1.4 1.2 1 Clac/Cfru 0.8 0.6 0.4 0.2 0
0.0000 0.2000 0.4000 0.6000 0.8000 1.0000 1.2000 1.4000

y = -0.0715x2 + 1.011x R² = 0.9998

Alac/Afru

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PRIMERA PRÁCTICA HIDRÓLISISDE LACTOSA EN LECHE
Obtención de los datos tiempo-concentración a partir de las áreas de pico de los cromatogramas. Calibrado de galactosa.
Calibrado de galactosa (Cgal/Cfru vs. Agal/Afru)
0.7000 0.6000 0.5000 0.4000 0.3000 0.2000 0.1000 0.0000 0.0000

y = -2.9629x3 + 2.8458x2 + 0.4564x - 5E-05 R² = 0.9988

0.1000

0.2000

0.3000

0.4000

0.5000

0.6000

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PRIMERA PRÁCTICA HIDRÓLISIS DE LACTOSA EN LECHE
Obtención de los datos tiempo-concentración a partir de las áreas de pico de los cromatogramas. Calibrado de glucosa.
Calibrado de glucosa (Cglu/Cfru vs. Aglu/Afru)
0.7000 0.6000 0.5000 0.4000 0.3000 0.2000 0.1000 0.0000 0.0000

y = -2.5188x3 + 2.1199x2 + 0.7152x - 0.0009 R² = 0.9994

0.1000

0.20000.3000

0.4000

0.5000

0.6000

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PRIMERA PRÁCTICA HIDRÓLISIS DE LACTOSA EN LECHE
Obtención de los datos tiempo-concentración a partir de las áreas de pico de los cromatogramas. Un ejemplo: Datos originales
tiempo (min)

Alac Aglu Agal Afru 0 25.7 0 0 17.8 5 14.3 3.7 2.9 18.8 10 14 5.9 4.6 21.4 15 11.1 8 6.3 21.5 22 9.7 10.8 8.422.6 30 6.4 10 7.9 18.9 40 5.3 11.2 8.8 21.3 50 3.8 11.3 9.5 21.3 60 2.8 11.7 10.2 21.3

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PRIMERA PRÁCTICA HIDRÓLISIS DE LACTOSA EN LECHE
Obtención de los datos tiempo-concentración a partir de las áreas de pico de los cromatogramas. Un ejemplo: Relación de áreas y calibrados.
tiempo (min) Alac/Afru Aglu/Afru Agal/Afru Calibrado de glucosaCglu/Cfru frente a Aglu/Afru y = -2,5188x3 + 2,1199x2 + 0,7152x 0,0009 0.0000 R² = 0,9994 0.1543 0.2150 Calibrado de galactosa: Cgal/Cfru frente a Agal/Afru y = -2,9629x3 + 2,8458x2 + 0,4564x - 5E05 0.2930 R² = 0,9988 0.3717 0.4180 Calibrado de lactosa: Clac/Cfru frente a Alac/Afru y = -0.0715x2 + 1.011x 0.4131 R² = 0.9998 0.4460 Cfru (g/L) 0.4789 2 f.dilución 21

0 5 10

1.4438 0.7606 0.65420.0000 0.1968 0.2757

15 22 30 40 50 60

0.5163 0.4292 0.3386 0.2488 0.1784 0.1315

0.3721 0.4779 0.5291 0.5258 0.5305 0.5493

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PRIMERA PRÁCTICA HIDRÓLISIS DE LACTOSA EN LECHE
Obtención de los datos tiempo-concentración a partir de las áreas de pico de los cromatogramas. Un ejemplo: relación de concentraciones.
Relación de...