Proyecto de reciclaje

QUANTA LiteTM Gliadin IgG II
Para Diagnóstico In Vitro
Complejidad de CLIA: Alto

704520

QUANTA LiteTM Gliadin IgG II es un ensayo basado en la técnica ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) para la detección semi cuantitativa de anticuerpos gliadina IgG en suero humano. La presencia de anticuerpos anti-gliadina puede utilizarse conjuntamente con los resultados de la exploración físicay otros análisis de laboratorio para ayudar a diagnosticar la enfermedad celíaca.

Aplicación

Sumario y Explicación de la prueba
La enfermedad celíaca y las enteropatías sensibles al gluten son afecciones crónicas cuya principal manifestación consiste en la inflamación y característico aplanamiento histológico de la mucosa que provoca un síndrome de mala absorción intestinal. La etiologíaprecisa de la enfermedad sigue siendo desconocida, aunque está claro que la gliadina, o la fracción soluble en alcohol del gluten de trigo, es el agente tóxico.1 Inicialmente, se utilizaba una serie de múltiples biopsias intestinales para diagnosticar los trastornos celíacos y de tipos similares. Hoy en día, se han propuesto los tests serológicos para el muestreo de pacientes con evidencias deenteropatías sensibles al gluten, así como para controlar la adecuación de la dieta.2-5 La Sociedad Europea de Pediatría Gastroenterológica y Nutrición (European Society of Pediatric Gastroenterology and Nutrition; ESPGAN) ha recomendado el uso de marcadores serológicos como la gliadina, así como los anticuerpos de la reticulina y endomisio para reducir el número de biopsias intestinales necesariaspara efectuar el diagnóstico.6 Recientes investigaciones han revelado que los anticuerpos anti-gliadina presentes en los pacientes celíacos se unen a un número muy limitado de epítopes específicos de la molécula de gliadina.7,8 Esos mismos estudios han revelado también que la desamidación de la gliadina por la enzima asociada a la enfermedad celíaca, la transglutaminasa tisular, favorece su unión alos anticuerpos anti-gliadina. Basándose en las anteriores observaciones, se ha demostrado que los análisis que utilizan péptidos desamidados y específicos consiguen una mayor exactitud en el diagnóstico de la enfermedad que los análisis anti-gliadina habituales.9 Tanto los anticuerpos de la gliadina IgA como de la IgG son detectables en el suero de pacientes con enteropatías sensibles algluten.2,3 Los anticuerpos de la gliadina IgG parecen ser marcadores más sensibles pero menos específicos de la enfermedad en comparación con los anticuerpos de la clase IgA. Los anticuerpos de la gliadina IgA son menos sensibles pero más específicos. Una estrategia de muestreo sensible para una población de riesgo incluiría los tests para los anticuerpos de la gliadina, tanto de tipo IgG como de tipo IgA,puesto que una importante proporción de los pacientes con trastornos celíacos tienen carencia de gliadina IgA.10 Los anticuerpos de la gliadina IgA resultan más interesantes para realizar un seguimiento de la actividad de la enfermedad a lo largo del tiempo y para controlar hasta qué punto se sigue una dieta sin gluten.5

Procedimiento de trabajo
Los péptidos de gliadina purificados se unen alas cavidades de una placa microperforada de poliestireno en condiciones que conservan el antígeno en su estado original. Se añaden controles y muestras convenientemente diluidas en pocillos separados, uniéndose durante la incubación los anticuerpos anti gliadina al antígeno que los recubre. El resto de componentes no unidos se elimina mediante lavado y se añade conjugado anti IgG humana a cadapocillo. Un segundo paso de incubación permite que el conjugado se una a los anticuerpos presentes. Tras un lavado que elimina el conjugado sobrante, se añade un sustrato cromógenico y tras incubación la actividad enzimática presente en el pocillo es proporcional a la intensidad de color desarrollado. El ensayo puede ser evaluado fotométricamente comparando la intensidad de color en las muestras...