Pruebas bioquímicas

Prueba bioquímica Consistencia del medio Tipo de siembra Composición del medio de prueba (sustratos) Fundamento bioquímico Utilidad Temperatura y tiempo de incubación Reactivos adicionales Interpretación Reporte de resultados
TSI (agar hierro triple azúcar) Sólido pico de flauta Inoculación den cola de pescado.

Picadura de la capa profunda

Puede invertirse el orden de acuerdo con laspreferencias.

Cultivo puro, colonia única 7.4
Extracto de carne 3g
Extracto de levadura 3g
Peptona 20g
Lactosa 10g
Sacarosa 10g
Dextrosa 1g
Sulfato ferroso 0.2g
Tiosulfato de sodio 0.3g
Cloruro de sodio 5g
Agar 12g
Rojo de fenol 0.024g
Agua destilada 1000ml
El mismo que KIA

Sacarosa 1%

Sacarosa---Glucosa + fructosa

Determinar la capacidad de un microorganismo de atacar unhidrato de carbono específico incorporado en un medio de crecimiento básico, con producción o no de gases, junto con la determinación de posible producción de ácido sulfhídrico 35°C

18-24horas, ni antes ni después ---------------------------- 1.-Pico de flauta rojo: reacción alcalina
- fondo amarillo: reacción acida
-fondo negro: producción de H₂S
2.-pico de flauta amarillo: reacción acida-fondo amarillo: reacción acida
-fondo negro: producción de H₂S
3.- pico de flauta rojo: reacción alcalina
Fondo rojo: reacción alcalina (m.o. facultativo)
Fondo naranja rojizo:
Ligeramente alcalino
(m.o. aerobio)
4.- pico de flauta naranja rojizo : ligeramente alcalino
Fondo naranja rojizo: ligeramente alcalino
5.-Presencia de burbuja, fragmentación del medio, desplazamiento delmedio desde el fondo del tubo, desprendimiento del medio del tubo: producción de gas
K/A
Fermentación de glucosa, ausencia de fermentación de lactosa o sacarosa.
K/A/H₂S
Fermentación de glucosa; ausencia de fermentación de lactosa o sacarosa, producción de sulfuro de hidrogeno.
A/A
Fermentación de glucosa y lactosa o sacarosa
K/K
Ausencia de fermentación de carbohidratos
Citrato deSimmons Sólidos, pico de flauta, largo con poca profundidad Únicamente en cola de pescado, sobre un medio de pico de flauta.

Inoculo liviano, ya que un inoculo grande puede obtenerse un color amarillo claro a cobrizo, sin afectar el medio de mas abajo, pero este color no indica una reacción positiva. Un inoculo demasiado espeso puede dar un falso positivo
Sulfato de magnesio 0.2gMonofosfato de amonio o fosfato de amonio dihidrogenado 1g
Fosfato dipotásico 1g
Citrato de sódio (2.77g, 5 ½ de H2O) 2g (o de potasio)
Cloruro de sódio 5g
Agar 15-20g
Azul de bromotimol (solución alcohólica al 1.5%) 0.08g
Agua destilada 1000ml
Indicador de pH, azul de bromotimol: alcalino-7.6-azul de Prusia.
Ácido-6-amarillo
No inoculado-6-verde.
Citrato— oxalacetato +acetatooxalacetato--- piruvato +CO2
La degradación del piruvato depende el pH del medio.
pH alcalino
Piruvato ----acetato + formato
Piruvato….acetato +CO2+ lactato
Piruvato….acetoína + 2CO2
Sales de amonio, como púnica fuente de nitrógeno Determinar si un organismo es capaz de utilizar citrato como única fuente de carbono para el metabolismo, provocando alcalinidad. 35° C

24-48horas
A veces esnecesaria una incubación prolongada (hasta 4 días) ------------------------ Prueba positiva: Crecimiento con un color azul en el pico de flauta.

Prueba negativa: No se observa crecimiento ni cambio de color (verde) Positivo

Negativo
Caldo nitrato Líquido

(aunque se recomienda más que sea un semisólido para esta clase de determinación) Inoculo denso (de un cultivo puro de 18-24horas)Realizándose dos controles, uno sin inocular y otro con un microorganismo nitrato positivo pH: 7

Extracto de carne 3g
Peptona 5g
Nitrato de potasio 1g
Agua destilada 1000ml Un organismo obtiene su oxígeno del nitrato en condiciones anaerobias, el cual reducen, mediante los citocromos bacterianos que transportan electrones a las moléculas aceptoras específicas
No3- +2e-+2H+----NO2+H2O
2No3-...