pruebas bioquimicas

INTRODUCCIÓN
Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos presentes.
Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecerincorpora o no.
Las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc. Aun bacterias fuertemente relacionadas pueden separarse en dos especies diferentes con base a pruebasbioquímicas.

Existen diferentes pruebas, para las cuales se utilizan los siguientes medios:
Citrato Simmons:
El agar citrato de Simmons contiene citrato de sodio y fosfato de amonio como fuentes de carbono y de nitrógeno respectivamente y azul de bromotimol como indicador de pH. Sólo las bacterias capaces de metabolizar el citrato podrán multiplicarse en este medio y liberarán iones amonio loque, junto con la eliminación del citrato (ácido), generará una fuerte basificación del medio que será aparente por un cambio de color del indicador de pH, de verde a azul.

TSI:
Este medio se utiliza para determinar la habilidad que poseen las bacterias para fermentar hidratos de carbono y producir sulfuro de hierro.
Los parámetros empleados para lograr la diferenciación son la fermentaciónpositiva o negativa de glucosa, la producción o no de ácido sulfhídrico, la fermentación positiva o negativa de lactosa o sacarosa y la producción o no de gas.

LIA:
Es utilizado para diferenciar microorganismos basado en la decarboxilación e desaminación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico.
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientespara el desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina es el sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y deaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los indicadores de la producción de ácido sulfhídrico. El purpura de bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color amarillo a pH igual o menor a5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8.

Caldo rojo fenol:
Es utilizado para la diferenciación de cultivos puros, en base a su capacidad para fermentar carbohidratos como un criterio para su identificación.
Es un medio adecuado para la determinación de fermentación de azúcares; el medio es estable, de composición uniforme y permite hacer determinaciones en base a un viraje decolor. Cuando el microorganismo fermenta el azúcar estudiado, el pH del medio baja; entonces el rojo fenol vira de rojo a amarillo. Si no hay fermentación el caldo tiene una coloración naranja-rojiza.

Lactosa TTC con Tergitol:
El Agar lactosa TTC con tergitol es un medio de cultivo diferencial selectivo para la recuperación, detección y recuento de los microorganismos E.coli, Salmonella,Coliformes heridos y otros bacilos entéricos,  del agua clorada, mediante la técnica de filtración por membrana.
El Agar lactosa TTC está compuesto por digerido enzimático de caseína y digerido enzimático de tejido animal son el nitrógeno y fuentes minerales en Tergitol 7 Agar. El extracto de levadura proporciona vitaminas esenciales y la lactosa es el carbohidrato fermentable.  La degradación de lalactosa a ácido se ve apreciado por el indicador de pH azul de bromotimol, que cambia el color del medio de debajo de la membrana a amarillo e inhibe el crecimiento de los microorganismos Gram.-positivos, formadores de esporas de bacterias Gram.-negativas.
Caldo glucosa con campana Durham:
Este medio de cultivo líquido, está compuesto de triptona, peptona y dextrosa, los cuales son...